【摘 要】
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目的机械通气作为全麻病人术中通气管理手段、危重症病人通气支持手段,以及肺部病变治疗手段被广泛应用于临床。目前,关于机械通气本身在使用过程中存在致肺损伤的不良作用并可能造成不良结局的问题已被广泛认知并重视。如何减轻和避免这种必需医疗手段带来的副损伤是亟待解决的问题。机械通气肺损伤(ventilator-induced lung injury,VILI)除了机械因素产生的肺组织损伤外,炎性反应等生物伤
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目的机械通气作为全麻病人术中通气管理手段、危重症病人通气支持手段,以及肺部病变治疗手段被广泛应用于临床。目前,关于机械通气本身在使用过程中存在致肺损伤的不良作用并可能造成不良结局的问题已被广泛认知并重视。如何减轻和避免这种必需医疗手段带来的副损伤是亟待解决的问题。机械通气肺损伤(ventilator-induced lung injury,VILI)除了机械因素产生的肺组织损伤外,炎性反应等生物伤在损伤的发生过程中起重要作用。炎性反应受免疫系统在内的多系统调节,其环节复杂,涉及面广。组胺及其受体在多种炎症性疾病中的作用已被广泛研究。本研究拟观察组胺及组胺H1受体与VILI肺内炎性反应的关系,为研究机械通气时肺保护措施提供新的科学基础。方法清洁级健康雄性SD大鼠56只,周龄9~10周,体重250~300 g,采用随机数字表法分为7组(n=8):7组大鼠均麻醉后行气管内插管术,连接小动物呼吸机,对照组(Control group,C组)保留自主呼吸;正常潮气量组(Normal VTgroup,NV组)机械通气,设置通气参数为潮气量(VT)8 ml/kg,呼吸频率(RR)40次/分,吸呼比(I:E)1:1,吸入氧浓度(FiO2)21%;大潮气量通气组(High VTgroup,HV组),机械通气参数:VT40 ml/kg,余同NV组;生理盐水对照组(Saline group,S组):麻醉前30 min肌肉注射1.8 ml/kg生理盐水,余同HV组;H1受体拮抗剂氯马斯汀给药组(Cle1~3组):麻醉前30 min分别给予氯马斯汀0.45、0.9、1.8 mg/kg(浓度分别为0.25、0.5、1 mg/ml)肌肉注射,余同HV组。C组、NV组、HV组大鼠通气前后均取颈动脉血行血气分析,于通气4 h时处死,收集左肺支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar Lavage Fluid,BALF)离心,上清液采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定BALF中IL-6、TNF-α、组胺浓度,沉淀细胞离心重悬后用嗜酸性粒细胞染料染色行嗜酸性粒细胞(Eosinophil,EOS)计数,取部分右侧肺组织测量肺湿质量/干质量(W/D)比值,取右肺前叶HE染色行肺病理学检查,取部分右肺中叶进行免疫组织化学染色观察H1受体表达情况。S组、Cle1~3组大鼠于通气4 h时处死,收集左肺BALF离心,上清液用ELISA测定BALF中IL-6、TNF-α、白蛋白浓度,沉淀细胞离心重悬后EOS染料染色计数EOS,取部分右侧肺组织测量肺W/D比值。结果通气开始前,C组、NV组、HV组大鼠氧合指数(Pa O2/FiO2)比较差异无统计学意义。通气4 h后,与C组比较,NV组Pa O2/FiO2变化差异无统计学意义,HV组Pa O2/FiO2降低(P<0.05);与C组比较,NV组肺损伤评分增高(P<0.05);与NV组比较,HV组肺损伤评分增高(P<0.05),肺组织W/D比值增加(P<0.05);大潮气量机械通气组大鼠肺组织损伤严重。通气4 h后,BALF中IL-6、TNF-α浓度和EOS计数比较:与C组比较,NV组BALF中TNF-α浓度升高,EOS计数增加(P<0.05);与NV组比较,HV组BALF中IL-6、TNF-α浓度均升高,EOS计数增加(P<0.05)。通气4 h后肺内组胺及H1受体表达情况:与C组比较,NV组BALF中组胺浓度和肺组织H1受体表达情况差异无统计学意义;与NV组比较,HV组BALF中组胺浓度升高(P<0.05),肺组织中H1受体表达水平上调(P<0.05)。使用H1受体拮抗剂预给药处理的大鼠,通气结束后,与S组比较,Cle1~3组BALF中IL-6、TNF-α浓度均降低、EOS计数均减少(P<0.05),Cle2~3组肺组织W/D比值降低、BALF中白蛋白浓度降低(P<0.05)。不同剂量H1受体拮抗剂预给药相比较,Cle1~3组大鼠BALF中IL-6、TNF-α浓度依次降低(P<0.05),BALF中EOS计数和肺组织W/D比值未见明显差异。结论大潮气量致大鼠VILI中肺内组胺浓度及组胺H1受体表达升高,与肺内炎性反应变化趋势一致,阻断H1受体减轻VILI肺内炎性反应,可能起到一定肺保护作用。
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