有机磷农药(organphosphorus pesticides, OPs)是农药中重要的一类,在甲胺磷等高毒农药被禁用后,中毒农药三唑磷等被大量使用。随着三唑磷的广泛使用,导致农产品农药残留超标以及环境污染,对非靶标生物和人类健康造成了严重威胁。微生物修复是利用微生物分解或矿化农药残留,是目前国内外治理环境污染尤其是农药污染最有前景的方法。本研究旨在筛选分离高效降解三唑磷的微生物,分析其降解特性,克隆降解酶基因,为三唑磷农药残留的微生物修复提供科学依据。本文从湖南省农科院周边池塘分离到一株能以三唑磷为唯一碳源的菌株TDB-1。生理生化结合16S rDNA序列分析,表明该菌株为产酸克雷伯菌(Klebsiella oxytoca)。菌株TDB-1能够耐受高浓度三唑磷,耐受浓度高达2g·L-1。在三唑磷选择压下,其最适生长条件为pH7.0、35℃和2%(v/v)接种量。菌株TDB-1对pH有很宽的耐受范围,能适应pH4.0～10.0的环境。菌株TDB-1降解三唑磷速率符合一级动力学方程,降解速率常数k为0.6757,半衰期t1/2为9.7558mm-1。细胞表面亲疏水性实验结果表明,三唑磷浓度越高,其细胞表面的疏水性越高。根据有机磷降解酶基因保守序列,设计特异性引物,克隆得到一个1134bp片段,根据该片段,采用Self-formed adaptor PCR(SEFA PCR)克隆该片段3’端侧翼序列355bp。序列分析表明,片段中包含一段与腈水解酶基因有较高的同源性的序列,以及其下游与未知功能基因的序列,该结果为深入研究菌株TDB-1降解三唑磷的调控基因及调控机制打下了基础。