本课题在生地注射液治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)临床显示出一定疗效的基础上,开展了生地低聚糖治疗COPD的新药临床前基础研究。以生地低聚糖-RGOS为研究对象,对生地低聚糖提取工艺及其性质进行了研究,并对生地低聚糖的制备工艺进行了中试研究,在此基础上进行生地低聚糖雾化吸入剂和生地低聚糖冻干粉剂的研究,对制剂进行了质量标准、初步稳定性和纤毛毒性研究。旨在通过以上研究,为生地低聚糖吸入制剂的新药研究打下基础,其中的研究方法及试验数据也为中药雾化吸入制剂的研究提供了启示。主要研究工作如下:　　 1 生地低聚糖的柱分离工艺、生地低聚糖性质和中试研究　　 对生地低聚糖的柱分离工艺进行了研究,以吸附饱和后的最大吸附率为指标,进行了树脂型号的筛选。两种大孔吸附树脂沈脱液中都没有环烯醚萜。总糖溶液上HPD100与D101大孔树脂经水洗脱后,两者回收率相差不大,说明两种树脂对色素的吸附效果相当,因此两种树脂均可选用,鉴于HPD100树脂廉价易得,所以最后选择HPD100树脂。洗脱剂(水)的用量为6倍柱体积时将有效成分完全洗脱。采用气相色谱法测定提取液中的残留溶剂,结果:相对应对照品峰位均无峰出现,初步判定生地药材洗脱液中无有机残留量物。　　 对生地低聚糖溶解性能的测定、吸湿率考察、水分测定、临界相对湿度的测定、原料药稳定性初步研究、超声波对生地低聚糖溶液比旋光度的影响。结果:生地低聚糖溶解性能良好,适宜作以水为溶剂的雾化溶液。生地低聚糖平均含水量为3.30％,生地低聚糖临界相对湿度为70.7％。超声雾化仪对生地低聚糖溶液的物质成分基本无影响。　　 2 生地低聚糖雾化吸入剂的成型、质量标准和稳定性研究　　 溶血实验确定了雾化药液的最高浓度为0.40g/ml。确定了热压灭菌工艺:温度为121℃,表压力为97kPa,时间为20分钟。测定了超声波雾化溶液的速度和温度变化,结果为超声波雾化溶液随着超声波雾化溶液的体积减少,溶液温度缓慢升高。　　 生地低聚糖雾化吸入剂可见分光光谱法分析方法的建立(最大吸收波长的选择,标准曲线的绘制,稳定性考察,精密度考察,重现性考察,回收率考察)。生地低聚糖雾化吸入剂中水苏糖的高效液相测定方法的建立(标准曲线的建立,检出限,水苏糖对照品的精密度试验,重复性试验,供试品溶液的稳定性试验,加样回收率试验)。对生地低聚糖雾化吸入剂的质量进行检查,结果三批成品均符合药典规定。进行了生地低聚糖雾化吸入剂的影响因素实验和加速实验,结果表明,生地低聚糖雾化吸入剂质量稳定。　　 3 生地低聚糖冻干粉剂的成型工艺、质量标准、稳定性和纤毛毒性研究　　 研究生地低聚糖冻干粉剂的处方和工艺。以冻干粉的外观形状、颜色、以及再分散性为指标,分别考察以葡萄糖、乳糖、甘露醇以及三者两两混合为支架剂的用量比例。最后选中甘露醇为支架剂,用量为原料药溶液质量的5％。即质量百分比为95％的原料药和质量百分比为5％的辅料一甘露醇。建立了冻干工艺:降温曲线,确定了冻干工艺。最终确定工艺过程为:-40℃(2预冻10小时,-20℃保持8小时,-5℃保持4小时,12℃保持2小时,出箱,即得。　　 生地低聚糖冻干粉剂可见分光光谱法分析方法的建立(最大吸收波长的选择、标准曲线的绘制、稳定性考察、精密度考察、重现性考察、回收率考察)。生地低聚糖冻干粉剂HPLC-ELSD分析方法的建立(标准曲线的建立、水苏糖对照品的精密度试验、重复性试验、供试品溶液的稳定性试验、加样回收率试验)。对生地低聚糖冻干粉剂的质量检查,成品质量合格。并对生地低聚糖冻干粉剂进行了稳定性考察,结果其质量稳定。　　 纤毛毒性试验结果:浓度为0.40g/ml的生地低聚糖溶液、浓度为0.42g/ml的生地低聚糖冻干粉溶液与蟾蜍上颚黏膜接触0.5h,未产生明显纤毛毒性反应。