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大豆孢囊线虫(Heterodera glycines)是大豆上最重要的土传病原物之一。线虫在发育过程中经常会受到病原菌的威胁。为了抵御病原菌的危害,线虫往往会表达抗菌蛋白质,如溶菌酶,但是线虫对病原菌的具体防卫机制至今还不明确。溶菌酶是线虫中重要的防御酶,对植物线虫溶菌酶基因的功能研究,有助于解释线虫的具体防御机制,为植物线虫的防控提供理论基础。本研究通过筛选转录组文库,从大豆孢囊线虫中分离了3个溶菌酶基因;采用原位杂交技术确定溶菌酶基因在大豆孢囊线虫中的表达部位;采用qPCR方法检测溶菌酶基因在参与线虫防御作用中的转录特性,分析细菌感染线虫后线虫三个溶菌酶基因的表达模式;通过对溶菌酶基因RNA干扰后的大豆孢囊线虫放置三种细菌中1-7天存活率的测定来对溶菌酶的防御功能进行初步研究;采用计算菌落数、浊度测定法两种方法测定体外表达的溶菌酶蛋白对细菌的抑制作用。原位杂交结果表明Hg23324、Hg21698和Hg17337这3个溶菌酶基因均在肠细胞中表达。基因表达量变化分析结果表明,在枯草芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌诱导下,Hg23324基因表达显著上调。在金黄色葡萄球菌诱导下Hg21698和Hg17337基因表达显著上调。由此推测溶菌酶参与了线虫的防御作用。采用RNA干扰技术对溶菌酶的功能进行了初步的分析,经过dsRNA浸泡后,通过qPCR技术检测溶菌酶基因转录水平明显下降。线虫存活率的检测实验表明线虫溶菌酶基因Hg23324干扰后,线虫在枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌中的存活率均降低;溶菌酶基因Hg17337干扰后,线虫在金黄色葡萄球菌、苏云金芽孢杆菌中的存活率均降低;溶菌酶基因Hg21698干扰后,线虫在金黄色葡萄球菌、苏云金芽孢杆菌中的存活率均降低。推测是溶菌酶基因的干扰使得线虫免疫系统受到影响,对细菌感染变得敏感,存活率下降,以上表明溶菌酶可以发挥特定的作用来帮助线虫抵抗细菌。烟草瞬时表达溶菌酶基因后提取烟草蛋白,通过计算菌落数、浊度测定法两种方法测定粗提蛋白对细菌的抑制作用,结果表明:Hg23324重组蛋白可以抑制枯草芽孢杆菌;Hg17337重组蛋白可以抑制金黄色葡萄球菌;Hg23324和Hg21698重组蛋白可以抑制苏云金芽孢杆菌。从这些结果可知溶菌酶可在体外发挥作用。本研究首次分离了大豆孢囊线虫的溶菌酶基因,详细研究了其在线虫抵抗细菌中的表达水平和抑菌功能,为线虫防御机理的研究提供参考,为线虫生物防治机理的研究提供更好的方向。