大型真菌ITS鉴定及8种野生蕈菌的驯化研究

来源 :河北师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kim12344
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我国野生菌物种资源十分丰富。据不完全统计,我国食用菌(包括药用菌)约2000余种,其中已驯化成功的有50余种,主栽品种20多个,支撑了我国食用菌产业的健康、快速发展。本研究首先采用18S rDNA和28S rDNA基因间隔序列(ITS)鉴定技术,对从河北省野生菌产区采集到的27种野生高等真菌子实体及17种来自子实体的菌丝体(分离菌种)进行了鉴定。随后,对其中8种具有一定食用或药用价值的野生菌种开展了驯化研究,取得的主要结果如下:1.通过ITS分子生物学鉴定,结合形态学特征,确定了27种野生菌的分类地位。2.对17个来自子实体分离菌种的ITS分析结果表明,除1种为污染杂菌外,其余菌种身份均得到确认。3.对8种野生菌的驯化研究结果如下:(1)碳源筛选:最适宜橘黄裸伞和朱红栓菌生长的碳源为蔗糖;最适宜肉色香蘑、水粉杯伞、小白蘑和紫丁香蘑生长的碳源为可溶性淀粉;最适宜树舌灵芝和香杏丽蘑生长的碳源为麦芽糖。(2)氮源筛选:最适宜橘黄裸伞、树舌灵芝、水粉杯伞、小白蘑、紫丁香蘑生长的氮源为酵母粉;最适宜朱红栓菌生长的氮源为牛肉膏和硫酸铵;最适宜肉色香蘑生长的氮源为硫酸铵;最适宜香杏丽蘑生长的氮源为蛋白胨。(3)无机盐筛选:最适宜橘黄裸伞、朱红栓菌生长的无机盐为磷酸二氢钾,其次是硫酸镁;最适宜树舌灵芝生长的无机盐为硫酸镁,其次是磷酸二氢钾。(4)正交实验结果:橘黄裸伞最适宜的营养因子最佳组合配方为:蔗糖25g/L,酵母粉8g/L,磷酸二氢钾4g/L,硫酸镁2g/L;朱红栓菌最佳营养因子组合配方为蔗糖25g/L,牛肉膏5g/L,磷酸二氢钾3g/L,硫酸镁1g/L。(5)pH筛选:最适宜橘黄裸伞和紫丁香蘑生长的pH为5.5;最适宜朱红栓菌、肉色香蘑、树舌灵芝生长的pH为5.0。(6)温度筛选:最适宜橘黄裸伞和朱红栓菌生长的温度均为25℃。(7)光照筛选:橘黄裸伞、朱红栓菌两个菌株生长过程中均不需要光照,过多的光照还可能抑制橘黄裸伞菌丝的生长。(8)母种培养基配方筛选:最适合橘黄裸伞、树舌灵芝、水粉杯伞生长的培养基为玉米粉培养基;最适合朱红栓菌生长的培养基为木屑+麸皮煮汁培养基;最适合肉色香蘑、香杏丽蘑、紫丁香蘑生长的培养基为PDA+牛粪煮汁培养基;最适合小白蘑生长的培养基为PDA+蘑菇煮汁培养基。(9)原种培养基配方筛选:最适合橘黄裸伞生长的原种培养基配方为棉籽壳+麸皮培养基(棉籽壳83%,麸皮15%,葡萄糖1%,石膏1%,含水量65%,pH6~7);最适合朱红栓菌、树舌灵芝生长的原种培养基配方为木屑+棉籽壳培养基(木屑40%,棉籽壳43%,麸皮15%,葡萄糖1%,石膏1%,含水量65%,pH6~7);最适合肉色香蘑生长的原种培养基配方为麦粒+牛粪培养基(麦粒78%,干牛粪10%,麸皮10%,葡萄糖1%,石膏1%,含水量65%,pH6~7)。(10)出菇试验:成功获得了橘黄裸伞和朱红栓菌的子实体,橘黄裸伞第一潮菇产量为50g,生物学效率为13.3%;朱红栓菌第一潮菇产量为73g,生物学效率为16.2%。
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