硝基呋喃类抗生素是一类人工合成的具有5-硝基结构的广谱抗菌药物,是被用于治疗畜禽胃肠道疾病的药物或者饲料添加剂。该类药物也是一类具有潜在致癌和诱导有机体产生突变的物质。硝基呋喃类药物在动物体内代谢速度快,半衰期短,一般为几个小时,因此,对动物组织中硝基呋喃母体药物的准确检测是比较困难的,但硝基呋喃类药物的代谢产物能够与组织蛋白质形成稳定的蛋白质结合物,在动物组织体内残留较长时间。其代谢物能通过水解从蛋白质中释放出来。因此,硝基呋喃类药物的真实残留状况通常可利用检测其代谢物来体现。对于未经过体内代谢饲料、兽药等,一般可通过检测其原药含量确定该药物是否存在。　　欧盟于1995年发布指令要求此类药物不再允许使用在食用动物身上。硝呋索尔被欧盟1756/2002/EC禁用。但是目前,无论是在科研方面还是标准制定方面,国内对测定硝呋索尔残留的文献报道比较少,因而加快对硝呋索尔残留的检测研究,对保证食品安全具有十分重要意义。另外在国内外已经发表的关于检测硝基呋喃类药物的文献中,检测方法主要针对动物源食品中硝基呋喃类代谢物,而对于饲料中硝基呋喃类原药的检测研究报道不多。本课题采用高效液相色谱检测饲料中硝基呋喃类药物,能够从源头上保障动物饲料的安全,从而保障动物食品的安全,维护消费者的健康。对于硝基呋喃类药物代谢物的检测,本课题采用液相色谱-串联质谱法,该法具有定性定量准确、检测限低、灵敏度高等优点。　　建立了一种检测饲料中六种硝基呋喃类药物(呋喃西林、呋喃妥因、呋喃唑酮、呋喃它酮、硝呋索尔、硝呋奇特)的高效液相色谱(HPLC)检测方法。样品经乙腈为提取,固相萃取小柱净化后,经 HPLC进行定性定量分析。以乙腈和水为流动相,在梯度洗脱的条件下,六种硝基呋喃类药物能够很好的分离。六种硝基呋喃类药物的检出限(LOD)为0.15 mg/kg,定量限(LOQ)为0.3 mg/kg。该方法的线性范围为0.5~10 mg/L,六种硝基呋喃类药物的线性相关系数均不小于0.9940,线性关系良好。六种硝基呋喃类药物在0.5 mg/k g、1.0 mg/k g和2.0 mg/k g的添加水平下,平均回收率为76.2％～100.5%,准确度高,相对标准偏差为2.9%～8.2%,精密度较好,适用于饲料中硝基呋喃类药物的同时测定。　　建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)同时测定动物源食品中硝基呋喃类药物的代谢物3-氨基-2-唑烷基酮(AOZ)、5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮(AMOZ)、氨基脲(SEM)、1-氨基-2-内酰脲(AHD)和3,5-二硝基水杨酸肼(DNSH)的分析方法。样品经盐酸水解,2-硝基苯甲醛衍生,经乙酸乙酯提取净化。氮吹至干后,用1 mL乙腈-1‰甲酸水(20:80,V/V)定容,经Aquasil C18色谱柱分离,用液相色谱三重四级杆串联质谱以多反应监测模式(MRM)进行检测分析,内标法定量。结果表明,该方法的线性范围为0.5~10.0μg/L,五种硝基呋喃代谢物的线性相关系数均在0.9976以上,五种硝基呋喃类代谢物的检出限为(LOD)为0.2μg/kg,定量限(LOQ)为0.5μg/kg。在0.5μg/kg,1.0μg/kg、2.0μg/kg和4.0μg/kg的浓度添加水平,各样品的平均加标回收率为80.4%～102.9%,相对标准偏差为1.3%～10.0%。本法可作为动物源食品中五种硝基呋喃类代谢物残留量同时分析的有效手段。　　本课题运用高效液相色谱对硝基呋喃原药进行检测,能够从源头控制硝基呋喃类药物的使用和流通;并运用液相色谱-三重四级杆串联质谱法对该类药物的代谢物进行测定,以确保在不法分子在使用该类药物之后的动物源性食品的安全。课题中建立的HPLC方法适用于饲料中硝基呋喃类药物的测定,建立的LC-MS/MS方法适用于动物源食品中硝基呋喃类药物的代谢物的测定,满足欧盟对药物残留的检测要求。　　本课题完成的同时,应用硝基呋喃类药物的代谢物的LC-MS/MS检测方法制定了一项检验检疫行业标准《出口动物源食品中硝呋索尔代谢物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法》。