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研究目的:观察临床肺癌患者Th17/Treg失衡的特征,观察补正益气消癥方对Lewis C57BL/6肺癌小鼠的免疫功能调节作用,为其临床应用提供科学的试验依据。研究方法:1.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测法观察临床肺癌患者血清中Th17、Treg细胞的特征性表面标记物以及相关影响因子的表达情况。2.采用高频彩色超声实验、酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫组化等为手段,评价补正益气消癥方对C57BL/6小鼠Lewis肺癌的抑制和免疫功能调节作用。3.采用高频彩色超声实验、蛋白质免疫印迹(Western blot)、酶联免疫吸附试验(ELISA)以及免疫组化作为分析手段,以半枝莲为模型药物,评价半枝莲中总黄酮和总生物碱对C57BL/6小鼠Lewis肺癌的抑制和免疫调节作用。研究结果:1.临床肺癌患者分期与Th17、Treg相关性研究:腺癌组与鳞癌组患者外周血中RORγt、 Foxp3、IL-6、TGF-β1、IL-10均升高。RORγt/Foxp3比值越高,肿瘤的分期越高,呈正相关;IL-10与RORγt/Foxp3比值呈正相关,分期越高,IL-10浓度越高,RORγt/Foxp3比值越高;IL-6与RORγt/Foxp3比值呈正相关,分期越高,IL-6浓度越高,RORγt/Foxp3比值越高;在腺癌组和鳞癌组中,TGF-β1与RORγt/Foxp3比值呈正相关,分期越高,TGF-β1浓度越高。从RORγt、Foxp3的变化,可以推测肺癌患者外周血中Th17细胞和Treg细胞比例均升高且成正向直线相关的关系,且Treg/Th17较健康人升高明显。提示肺癌患者可能存在Treg/Th17比例失衡,以Th17细胞升高相对占优势。通过调控Th17/Treg失衡可能改善肺癌患者的免疫功能。2.补正益气消癥方对Lewis C57BL/6肺癌小鼠免疫调节研究:补正益气消癥方可显著抑制Lewis C57BL/6肺癌小鼠肿瘤容积以及瘤重;增强胸腺和脾指数;降低肺癌小鼠血清中RORγt、IL-17、IL-6、Foxp3、IL-10和TGF-β1的含量,提高IL-2和IFN-γ的含量(p<0.05)。体动物实验结果充分表明补正益气消癥方可通过调控Th17/Treg失衡达到抑制肺癌肿瘤生长的目的。3.组方中的半枝莲对Lewis C57BL/6肺癌小鼠免疫调节活性研究:半枝莲总生物碱和总黄酮能够显著降低脾组织和血清中RORγt、IL-17、IL-6、Foxp3、IL-10和TGF-β1的水平,并能显著升高IL-2和IFN-γ的水平。本部分结果表明,半枝莲抑制肺癌肿瘤生长与其调控Th17/Treg失衡作用密切相关。研究结论:1.肺癌随着分期的进展,Th17/Treg失衡现象愈发明显,其机制可能与肿瘤自身产生的细胞因子变化关联较大。RORγt/Foxp3的比例可以作为早期诊断的辅助观察指标,同时也可以参考判断预后。2.补正益气消癥方可显著抑制肺癌肿瘤的生长,可显著调控荷瘤小鼠Th17/Treg失衡。中药调节免疫功能成为治疗肺癌的重要措施。3.补正益气健脾消癥方中半枝莲具有显著抑制肺癌肿瘤生长作用,可显著调控Th17/Treg作用。