【摘 要】
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目的:研究长白山区道地药材长白瑞香与青楷槭的肝保护活性,筛选有效组分并分离活性单体,测定两种植物的细胞毒性及肝保护作用,运用网络药理学对其有可能的靶点和通路进行预测。方法:将青楷槭与长白瑞香药材分别进行粉碎后用传统中药化学成分提取法进行药材的回流提取,得到乙醇提取物。分别用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取物得到四个萃取层浸膏。运用多种色谱分离技术对青楷槭与长白瑞香乙酸乙酯层进行主要化学成
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目的:研究长白山区道地药材长白瑞香与青楷槭的肝保护活性,筛选有效组分并分离活性单体,测定两种植物的细胞毒性及肝保护作用,运用网络药理学对其有可能的靶点和通路进行预测。方法:将青楷槭与长白瑞香药材分别进行粉碎后用传统中药化学成分提取法进行药材的回流提取,得到乙醇提取物。分别用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取物得到四个萃取层浸膏。运用多种色谱分离技术对青楷槭与长白瑞香乙酸乙酯层进行主要化学成分的分离并进行结构鉴定。利用MTT法对青楷槭与长白瑞香进行了人宫颈癌细胞(HeLa)和人肝癌细胞(HepG2)生长抑制作用的测定。选择青楷槭与长白瑞香的总提物对四氯化碳诱导小鼠急性用肝损伤模型的保肝作用进行了研究,检测ALT,AST指标,确定两种植物的肝保护活性。基于网络药理学对青楷槭,长白瑞香活性成分与急性肝损伤靶点进行预测。结果:在青楷槭乙酸乙酯萃取部位的化学成分研究过程中,分离得到化合物4-hydroxyphenylethyl-l-O-β-D-[6’-O-(4-hydroxybenzoyl)]-glucopyranoside(1);在长白瑞香乙酸乙酯萃取部位的化学成分中分离得到的11个单体化合物利用核磁共振氢谱和碳谱等光谱分析手段确定了结构为β-谷甾醇(2)、芹菜素(3)、伞型花内脂(4)、双白瑞香素(5)、邻苯二甲酸二丁酯(6)、瑞香素(7)、柚皮素(8)、狼毒素(9)、瑞香苷(10)、紫丁香苷(11)、毛瑞香素E(12)。青楷槭与长白瑞香总取物的体内肝保护活性实验结果显示,其ALT、AST指标都低于模型组,并且细胞毒性小。另外青楷槭乙酸乙酯层、长白瑞香二氯甲烷层和乙酸乙酯层组均表现出较好的抗弓形虫效果。网络药理学结果显示青楷槭、长白瑞香当中瑞香素、伞形花内酯等成分与急性肝损伤的许多靶点有关,可作为治疗急性肝损伤的潜在药物;GAPDH,TP53,AKT1,ALB和MAPK3等是其蛋白质相互作用网络中的关键靶标;与急性肝损伤相关的途径包括MAPK信号传导,NF-κB信号传导,toll样受体信号传导,JAK-STAT信号传导等相关。结论:本次实验从青楷槭中分离出一个新化合物1,从长白瑞香中首次分离得到化合物6,9,12。体内外实验中青楷槭、长白瑞香都表现出一定的肝保护活性且细胞毒性较小,其作用机制有待进一步验证。
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