白纹雏蝗滞育特性及对环境因子响应研究

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白纹雏蝗Chorthippus albonemus主要取食禾本科牧草,为宁夏温性草原上的优势种,对宁夏草原造成的危害极大,预测预报、及早防控是控制草原蝗虫暴发的关键,而白纹雏蝗的胚胎发育、滞育特性及机制至今尚不清楚。为此本研究采用人工饲养培育蝗卵,将卵囊经过不同低温及不同时间处理后,在25℃恒温条件下培养,将部分卵囊定时取出后并解剖成每个单独的卵粒,再经固定、去黄、溶解、解剖观察并划分其发育阶段,另一部分继续在室内培养孵化研究其滞育特性。同时,为了进一步明确白纹雏蝗对天敌、植被、土壤及其气候等生物和非生物因子的响应,2019-2020年采用网捕法、陷阱法和样方法在宁夏温性草甸草原、温性草原、温性荒漠草原和温性草原化荒漠四类草原对白纹雏蝗、天敌、植被群落进行调查采集,运用典型相关分析白纹雏蝗对优势天敌、植被、土壤及气候等生物和非生物因子的响应进行了分析。以期揭示白纹雏蝗灾变发生机制,从而为草原蝗虫的综合防控提供了一定的科学依据。本文主要实验结论如下:1、白纹雏蝗卵胚胎发育阶段及滞育特性结果表明:25℃恒温培养条件下,根据胚胎形态特征,自发育期开始,白纹雏蝗卵胚胎发育可划分为12个阶段,其中蝗卵发育1-6 d处于发育期和原头期共四个阶段;7-12 d时处于胚转期和显节期有五个阶段;13-16 d处于显节期和胚熟期共有三个阶段。胚胎滞育研究结果表明,在自然条件下,入冬后11月近82%的卵进入滞育,3月份孵化率为34.4%,显著高于11月(18.33%)、12月(18.67%),3月份孵化期为28天,显著低于11月(86 d)、12月(50 d);不同低温及时间处理后恒温培养条件下,低温3℃处理30d的孵化率为32.64%,显著高于低温8℃处理30 d(25%),低温3℃处理30 d的孵化期为52d与8℃处理30 d(53 d)无显著差异;低温8℃处理90 d时卵块孵化期为55 d,低温8℃处理90d时孵化率最高为70.83%,显著高于低温3℃处理90 d(52.87%),说明滞育解除所需的最佳温度在不同时长下是不同的,经一个低温期后达到发育起点温度近55 d可达孵化高发期。2、不同孵化期白纹雏蝗转录组对比分析结果表明:本研究利用HiSeq测序平台对白纹雏蝗两个不同孵化期(夏蝗、秋蝗)的4个生物体样本(不同孵化期各两个样本)进行转录组测序。4个样品的平均GC含量差值较小;Q20均大于96%;Q30均大于90%。表明测序结果良好,可以进行后续的的数据挖掘与分析工作。拼接转录本共有274534个基因,最小长度为201bp,对最大长度为20181bp,总长度为150006063 bp,平均长度为546.4 bp。拼装得到的转录本Transcript去冗余,取每个转录本聚类中最长的转录本作为Unigene,以此作为后续分析的参考序列。该组合可产生157243个基因,最小长度为201 bp,最大长度为20181 bp,总长度为80733283 bp,平均长度为513.43 bp。后续用其中一个作参考将各样本回接,统计并分析了 SNP数量及杂合度,通过T检验得知白纹雏蝗“夏蝗”与“秋蝗”间组内杂合度与组间杂合度无显著差异性。表明不同孵化期的白纹雏蝗是同一代,自卵越冬后可能因为滞育等其他原因导致了不同的孵化期。3、白纹雏蝗对环境因子的响应结果表明:在宁夏四类草原上确定42个监测样区及田间监测的基础上,进一步分析了白纹雏蝗对天敌优势种及环境因子响应。其中,白纹雏蝗发生虽与直角通缘步甲Pterostichus gebleri、麻步甲Carabus brandti和短翅伪葬步甲Pseudotaphoxenus brevipennis三种优势天敌步甲无显著相关性,但与麻步甲和直角通缘步甲具有一定正相关关系,而与短翅伪葬步甲呈现出一定负相关关系;与禾本科植被盖度、生物量、豆科植被频度、菊科生物量、其他科植被生物量间均存在极显著正相关关系,与菊科植被盖度和豆科植被高度间均存在显著正相关关系;与土壤饱和持水量、毛管持水量、田间持水量、毛管孔隙度、总孔隙度和有机质间均呈极显著正相关关系,和碱解氮间呈显著正相关关系,与土壤容重和PH间均呈极显著负相关关系;与降水量间呈显著正相关关系,与平均气温和最高气温间均呈极显著负相关关系。
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