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目的:本研究通过检测食管鳞癌组织中CK1δ、COX-2、NF-KBP65的表达,探讨CK1δ、COX-2、NF-KBP65与食管癌发生、浸润、转移的关系;并分析CK1δ、COX-2、NF-KBP65表达之间的相关性。
方法:
1.应用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)S-P法检测59例食管鳞状细胞癌、25例不典型增生组织和15例正常食管粘膜中CK1δ、COX-2、NF-KBp65的蛋白表达。
2.应用流式细胞术(Flow cytomery,FCM)定量检测40例食管鳞状细胞癌、30例非典型增生组织和20例切缘正常食管粘膜组织中CK1δ、COX-2蛋白含量。
结果:
1.CK1δ在不同食管组织中的表达应用IHC法检测59例食管鳞状细胞癌、25例不典型增生组织和15例正常食管粘膜中CK1δ的表达,结果显示CK1δ在癌组织的阳性表达率(65%)明显高于非典型增生组织(25%)和正常粘膜(13.3%),癌组织的阳性表达率与非典型增生组织和正常粘膜的阳性表达率之间有显著差别(P<0.01)。在9例中度非典型增生组织中有3例(33.3%)表达阳性,16例轻度不典型增生组织中有3例阳性(18.5%),15例正常粘膜的阳性表达1例(6.7%),表达率之间呈逐渐增高趋势,但他们之间的差别无显著性(P>0.05).可能与标本例数少有关。CK1δ的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度、细胞分化程度无关(P>0.05),但与淋巴结转移有关(P<0.05)。应用FCM法对40例食管鳞状细胞癌、30例非典型增生组织和20例正常粘膜中CK1δ的蛋白含量(均道值)的检测结果显示:癌组织中CK1δ蛋白含量(233.41±65.03)高于非典型增生组织(89.80±69.25)和正常黏膜(33.04±54.97)它们彼此两两之间的蛋白含量存在显著性差异(P<0.01)℃K1δ的蛋白含量与浸润深度和患者的性别、年龄、肿瘤大小、细胞分化程度无关(P>0.05),但与淋巴结转移(P<0.05)有关,此结果与IHC结果基本一致。
2.COX-2在不同食管组织中的表达应用IHC法检测59例食管鳞状细胞癌、25例不典型增生组织和15例正常食管粘膜中COX-2的表达,结果显示COX-2在癌组织的阳性表达率(54%)明显高于非典型增生组织(24%)和正常粘膜(0%)。癌组织与非典型增生组织和正常粘膜的阳性表达率之间有显著性差别(P<0.01)。在9例中度非典型增生组织中有3 例(33.3%)表达阳性,16例轻度不典型增生组织中有1例(6.25%)阳性,15例正常食管粘膜中无阳性表达(0%),表达率之间呈逐渐增高趋势,但他们之间的差别无显著性(P>0.05)。可能与标本例数少有关。COX-2的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、细胞分化程度无关(P>0.05),但与淋巴结转移及浸润深度有关(P<0.05)。
应用FCM法对40例食管鳞状细胞癌、30例非典型增生组织和20例正常粘膜中COX-2的蛋白含量(均道值)的检测结果显示:癌组织中COX-2蛋白含量(395.02±81.78)高于癌旁(235.31±101.14)和正常黏膜(172.58±79.39),它们彼此两两之间的蛋白含量存在显著性差异(P<0.01)。且COX-2的蛋白含量与患者的性别、年龄、肿瘤大小、细胞分化程度无关(P>0.05),与淋巴结转移和侵润深度(P<0.05)有关,此结果与IHC结果基本一致。
3.NF-KBP65在不同食管组织中的表达应用IHC法检测59例食管鳞状细胞癌、25例不典型增生组织和15例正常食管粘膜中NF-KBp65的表达,结果显示NF-KBP65在癌组织的阳性表达率(61.0%)明显高于非典型增生组织(20%)和正常粘膜(13.3%),癌组织的阳性表达率与非典型增生组织和正常粘膜的阳性表达率之间有显著性差别(P<0.01)。在9例中度非典型增生组织的阳性表达3例(33.3%),在16例轻度非典型增生组织的阳性表达2例(12.5%),在15例正常粘膜中阳性表达l例(13.3%),非典型增生组织的阳性表达和正常粘膜中阳性表达之间呈逐渐增高趋势但他们之间的差别无显著性(P>0.05),可能与标本例数少或取材有关。NF-KBP65在胞浆中的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、细胞分化程度、浸润深度和淋巴结转移均无关。NF-KBP65在胞核中的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、细胞分化程度无关(P>0.05),但与淋巴结转移及浸润深度有关(P<0.05)。
4 NF-KBP65蛋白在胞浆中的表达与CK1δ的蛋白表达无明显相关关系(r=-0.013)(P>0.05)(IHC)。
5 NF-KBP65蛋白在胞浆中的表达与COX-2的蛋白表达无明显相关关系(r=-0.008)(P>0.05)(IHC)。
6 食管鳞状细胞癌中CK1δ蛋白与COX-2的蛋白的表达呈高度正相关关系(r=0.482)(P<0.01)(FCM)。
7 食管鳞状细胞癌中CK1δ蛋白与NF-ΚBp65蛋白在胞核的表达呈正相关关系(r=0.302,p<0.05)(IHC)。
8 食管鳞状细胞癌中NF-KBp65蛋白在胞核的表达与COX-2的蛋白表达之间呈正相关关系(r=0.332,P<0.05)(IHC)。
结论:
1.CK1δ在食管鳞状细胞癌中的表达明显高于非典型增生组织和正常粘膜,提示CK1δ过表达可能与食管癌的发生有关;CK1δ过表达与淋巴结转移相关,提示CK1δ可能参与调节食管癌的恶性表型,并促进食管癌的转移。
2.COX-2在食管鳞状细胞癌中的表达明显高于非典型增生组织和正常粘膜,提示COX-2过表达可能与食管癌的发生有关;COX-2过表达与侵润程度和淋巴结转移有关,提示COX-2可能在食管癌的浸润转移中发挥作用。
3.NF-ΚBP65在食管鳞状细胞癌中的表达明显高于非典型增生组织和正常粘膜,提示NF-ΚBP65表达可能与食管癌的发生有关,NF-ΚBP65胞核过表达与侵润程度和淋巴结转移相关,NF-ΚBP65胞浆过表达与侵润程度和淋巴结转移无关,提示可能NF-ΚBP65胞浆表达是其的非活化形式,而胞核表达是其活化形式,通过活化(胞核表达)发挥重要的生物学作用,即促进食管癌浸润转移。
4 在食管癌组织中,CK1δ与NF-ΚBP65的表达呈正相关,CK1δ与COX-2蛋白的表达呈正相关,NF-ΚBP65与COX-2也呈正相关,提示CK1δ、COX-2、NF-ΚBP65三者之间在食管癌的浸润转移中可能存在协同作用。