DOSY技术辅助扁桃斑鸠菊化学成分分离及其抗氧化和抗乳腺癌活性的研究

来源 :广西大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:okanyo
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
扁桃斑鸠菊是菊科(Compositae)类植物,是非洲民间—种药食两用植物,广泛分布于东非和西非地区。扁桃斑鸠菊中具有复杂多样的化学成分,且具有多种药理学活性。其被当地人称为苦叶茶,可用作抗癌药、抗菌药、抗疟药和抗寄生虫药等,这使得扁桃斑鸠菊具有很好的药用价值和开发前景。除被当地人药用外,还当作蔬菜食用,使得当地妇女的乳腺癌发病率低于正常水平,表明其具有相当好的抗乳腺癌活性。本研究以体外抗乳腺癌活性实验为导向,以DOSY技术定向追踪扁桃斑鸠菊中潜在抗乳腺癌活性组分—甾体皂苷,并指导其分离纯化,为DOSY技术在天然产物分离纯化中的应用奠定基础。同时,评价提取分离得到的成分的抗乳腺癌和抗氧化活性,为今后更深入地研究提供重要数据。本课题预实验中采取三种不同方案提取扁桃斑鸠菊,溶剂为石油醚、乙酸乙酯、85%乙醇和去离子水,得到十个浸膏(VA1-10)。对于四个不同极性部位浸膏VA4、VA5、VA6和VA7,分别用DPPH、ABTS和羟基自由基实验进行了体外抗氧化性能评价。为了确定抗乳腺癌活性部位以及最佳提取方案,对于不同条件得到的乙酸乙酯浸膏(VA2、VA6和VA9)和85%乙醇浸膏(VA3、VA7和VA8),以人乳腺癌细胞珠(MCF-7)为模型,采用CCK-8法进行了抗乳腺癌活性测试。测试活性部位乙酸乙酯浸膏中的DOSY谱图,确定乙酸乙酯浸膏是否具有甾体皂苷物质。对大量提取得到的乙酸乙酯浸膏(A1)和其六个粗分组分(A2-7)进行抗乳腺癌活性评价及DOSY谱图测试。此外,运用DOSY技术指导活性组分A6中甾体皂苷快速分离纯化,分离纯化A6获得五个物质F1-5,运用NMR、IR、UV、HPLC和MS等技术进行表征,确定了 F5为两个甾体皂苷vemonioside D1和vernonioside D2的混合物,对F5进行了抗乳腺癌活性评价。扁桃斑鸠菊体外抗氧化活性研究结果表明:(1)浓度范围为0.025-1.0 mg.mL-1时,VA4、VA6和VA7对DPPH和ABTS自由基均具有良好的清除能力,VA5对这两种自由基的清除能力较为温和。(2)浓度范围为0.1-5.0 mg.mL-1时,VA4、VA6和VA7对羟基自由基均具有良好的清除能力,VA5对羟基自由基的清除能力较为温和。总之,在相同浓度时,VA7对DPPH、ABTS和羟基自由基清除能力最强;VA5清除三种自由基的能力最弱。DOSY实验结果表明:运用DOSY技术追踪到扁桃斑鸠菊的乙酸乙酯浸膏中含有甾体皂苷类物质,且乙酸乙酯中强极性段(A6和A7)具有甾体皂苷类物质。运用DOSY技术追踪活性组分A6,成功的分离纯化到甾体皂苷F5,说明DOSY技术可用于辅助天然产物中某一类具有特定官能团物质快速地分离纯化。体外抗乳腺癌实验结果表明:(1)预实验:确定了扁桃斑鸠菊的乙酸乙酯部位为抗乳腺癌活性部位,且对MCF-7细胞的抑制率呈明显的浓度-效应关系,其中乙酸乙醋浸膏VA6在浓度为55μg·mL-1时,具有最佳的抗乳腺癌活性,其抑制率为85.43%,确定了抗乳腺癌活性成分的最佳提取条件为以乙酸乙酯为溶剂在50℃下进行提取。(2)大量提取后:A5、A6和A7三个粗分部位在浓度为50 μg·L-1时,对MCF-7乳腺癌细胞均具有很好的抑制作用,其抑制率分别为64.08%、81.75%和78.57%,抑制率均高于乙酸乙酯浸膏A1,确定A5、A6和A7为A1中的活性部位,其中A6为抗乳腺癌活性最佳的部位。(3)甾体皂苷F5:用CCK-8法对F5进行了抗乳腺癌活性评价,在浓度为100 μg·mL-1时,对MCF-7乳腺癌细胞具有良好的抑制作用,其抑制率为77.53%,推断甾体皂苷是扁桃斑鸠菊中的抗乳腺癌活性物质之一,但是F5的抑制率低于A1和A6,推断甾体皂苷和乙酸乙酯浸膏中其它抗乳腺癌成分具有协同作用。
其他文献
目的:结直肠癌肝转移与肿瘤微环境关系密切,相互影响。转移至肝脏的肠癌细胞需要建立起适合自身生长的微环境才能生存,同时肝脏微环境中的多种细胞和非细胞成分也促进肿瘤生
发展社会组织是建立社会公共利益保护机制的必然,而激活社会组织活力,则使其承担公共利益保护职能成为可能。研究发现,社会组织活力不足表现为:服务能力孱弱、规范性与自主性
维生素A(vitamin A,VA)是人体必需微量营养素,与人体免疫调节密切相关。维生素A缺乏(vitamin A deficiency,VAD)被世界卫生组织公认为世界四大营养素缺乏病之一,是发展中国家
由张璋、黄畲编篡的《全唐五代词》,辑得唐五代宫怨词37首。从创作主体情感取向的维度,可分代宫人写怨、借宫人寄怨、代借兼容三类;而艺术表达,主要表现为烘染与描写、铺叙与
目的:观察应用奥美拉唑加复方铝酸铋颗粒加阿莫西林加克拉霉素四联根除幽门螺杆菌(Hp)治疗后,继续延长质子泵抑制剂和铋剂治疗,对胃炎患者临床疗效的影响。方法:选取60例Hp相
在一些不发达国家进行使馆建设,由于面临恶劣的自然环境、战后重建物资极度匮乏、港口管理混乱等问题,施工难度非常大,尤其在施工组织、工期控制方面难度更大.结合某使馆工程
为实现对蓄电池车辆调速控制系统的故障诊断,建立故障树模型,通过定性分析寻找最小割集,并以模糊数理论为工具进行定量分析。利用该方法所得到的分析结果,可以方便地确定系统
研究背景:法洛四联症(TOF)是最常见的复杂先天性心脏病,占全部先天性心脏病的3%-5%,其胚胎学发病机制较为复杂,目前神经嵴细胞迁移异常,内皮细胞间质化异常及心肌细胞分化异
为了研究压路机的振动液压系统故障发生的原因,以压路机振动液压系统作为研究对象,通过分析该系统的工作原理及其故障形式,提出了对压路机振动液压系统的故障基于模糊故障树
维持井底压力始终略大于实际地层压力的状态对于司钻法压井降低压井的安全风险、提高压井效率具有重要的意义。而这些意义能否实现,在于司钻法压井过程中能否依据现有的井控