足癣患者血清IL-12、IFN-γ、iNOS、NO表达水平的研究

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目的:足癣呈世界性分布,一些需长时间穿不透气胶鞋和长统靴的职业中,患病率高达80%以上。其致病真菌主要是红色毛癣菌,不规范治疗导致疾病复发和耐药菌的产生。近期研究表明,天然免疫在抗真菌免疫中起重要作用,可直接杀伤病原体并能激发适应性免疫。入侵的真菌等病原体被天然免疫系统识别是激发宿主产生免疫应答的第一步。一旦真菌感染,体内的吞噬细胞活化,分泌包括IL-12的多种细胞因子和炎性介质。IL-12是触发天然免疫应答的关键因子,也是激活Th1细胞介导特异性免疫应答的必要条件。IL-12对非特异免疫和特异性免疫都发挥重要作用,其架起非特异免疫和特异性免疫之间的桥梁,是一种前炎症细胞因子。IL-12能强有力地诱导天然免疫的NK细胞、APC及获得性免疫的Th1细胞等产生IFN-γ等细胞因子。INF-γ又是一个潜在的强有力的IL-12诱导因子,它的产生依赖于IL-12,但它产生以后反过来增加IL-12的分泌。IFN-γ作用于巨噬细胞产生诱生一氧化氮合酶(inducible NO synthase,iNOS),生成NO,而NO是清除真菌病原体的重要效应分子。NO在炎症反应的许多环节中发挥复杂的调节作用,其对外界病原微生物具有毒性作用。上述四种细胞因子由此构成一个正反馈途径,同时作为一个功能单位,可促进特异性免疫应答,成为联系天然免疫和获得性免疫应答的纽带。红色毛癣菌引起的足癣患者临床表现多为鳞屑角化型,病程慢性且易复发。本研究通过对足癣患者血清中IL-12、IFN-γ、iNOS、NO水平的检测,以探讨红色毛癣菌引起的足癣患者免疫功能是否存在异常以及这四种细胞因子在免疫发病机制中所起的作用。方法:1、病例选择患者组30例足癣患者(真菌培养均为红色毛癣菌)均来自河北医科第二医院皮肤科门诊。入选标准:凡临床症状典型,真菌直接镜检阳性,诊断为足癣,且培养确定是红色毛癣菌者,年龄18~70岁,非妊娠及哺乳期妇女,就诊前1周内未外用或1个月内未系统应用过抗真菌药,以及2个月内未用皮质类固醇激素和免疫抑制剂等影响全身免疫功能药物的患者。排除标准:就诊前1周内曾外用或1个月内系统应用过抗真菌药,以及2个月内曾用皮质类固醇激素和免疫抑制剂的患者,及合并有其它系统性疾病和免疫性疾病的患者。对照组:来自健康志愿者,共20例。均无足癣疾患和自身免疫性疾病及家族史。经t检验,性别、年龄与病例组无显著差异。2、征得患者同意采静脉血5毫升,提取血清分装,-20℃保存备用。3、取材及培养:用钝刀刮取病变处鳞屑(或剪取疱壁),同时做真菌镜检和培养。采用25℃恒温培养,随时观察培养情况,4周以上无菌落生长判定为阴性。4、菌种鉴定:皮肤癣菌主要根据菌落形态、小培养的镜下结构进行鉴定,确定真菌的种属。5、细胞因子测定:采用双抗体夹心ELISA方法分别检测实验组及对照组血清中IL-12、IFN-γ的浓度;应用721分光光度计法测定实验组及对照组血清中iNOS、NO的浓度。操作过程均按试剂盒说明书进行。6、统计学方法:所得数据经SPSS11.5软件进行统计学处理,数据用均数±标准差(—X±s)表示,采用t检验分析足癣患者与正常对照组, IL-12、IFN-γ、iNOS、NO的血清水平有无显著性差异; P<0.05有统计学意义。结果:检验数据采用SPSS11.5统计学软件,两样本t检验。1.血清中IL-12测定结果(单位pg /ml):足癣患者血清IL-12平均值为8.0633±1.936,对照组为11.6115±2.424,病例组水平低于对照组,P < 0.05,差异有统计学意义。2.血清中IFN-γ测定结果(单位pg /ml):足癣患者血清IFN-γ平均值为9.1763±1.033,对照组为13.3555±1.506,病例组水平低于对照组,P < 0.05,差异有统计学意义。3.血清中iNOS测定结果(单位U /ml):足癣患者血清iNOS平均值为11.4270±1.007,对照组为20.4315±0.795,病例组水平低于对照组,P <0.05,差异有统计学意义。4.血清中NO测定结果(单位μmol /L):足癣患者血清NO平均值为60.572±5.174,对照组为79.388±6.365,病例组水平低于对照组,P < 0.05,差异有统计学意义。结论:1.足癣患者外周血血清IL-12、IFN-γ、iNOS、NO表达水平降低。2.感染红色毛癣菌的足癣患者存在免疫功能低下,IL-12、IFN-γ、iNOS、NO表达水平降低可能与患者的慢性感染有一定联系。
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