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近年来,扬州市高邮区域部分罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)养殖塘口出现“生长缓慢”症状,虾农统称为“铁壳虾”,“铁壳虾”现象凸显,给虾农带来了一定的经济损失和巨大的精神压力。国内学者从多方面对其进行了研究,但是,迄今为止,对于引起罗氏沼虾生长阻滞现象的主要原因仍无定论。罗氏沼虾作为甲壳动物,其生长伴随着蜕壳的过程,而蜕壳受到蜕壳激素的影响,生长阻滞的罗氏沼虾有可能存在激素水平的异常,而与激素相关的基因表达也可能表现出不同。因此,本论文假定,生长阻滞罗氏沼虾的激素含量及其相关基因的表达完全不同于生长正常的罗氏沼虾。为了验证上述假说,本论文以高邮区域人工饲养的罗氏沼虾为研究对象,首先测定采集样本个体的形态学参数,采用不同的数学统计方法对各形态学参数进行分析,确定鉴定罗氏沼虾生长阻滞个体的最佳统计学方法和最佳度量的参数;然后按照以上确定的最佳参数对不同的样本进行分类,对分类个体进行蜕皮时期的判别,选择蜕皮间期的罗氏沼虾,通过酶联免疫法测定各类样本中蜕皮激素、蜕皮抑制激素和甲基法尼酯的含量,通过荧光定量PCR测定各类样本的肝胰腺和眼柄中生长相关基因的mRNA表达水平,通过Western Blot测定各类样本的肝胰腺和眼柄中EcR蛋白的表达,探讨各类激素及其相关基因在生长阻滞现象中的作用,揭示影响水生甲壳类动物生长的生理调控机制,为广大养殖户的健康养殖提供可能的新措施和新方法。研究结果如下:1)聚类分析中能够将样本划分为正常虾、正常幼虾和阻滞虾的参数有体重、肥满度和第一尾节宽度/体长;主成分分析中能够区分三类虾的参数有体长、腹尾长、螯长、第一尾节宽度、体长/体重、腹尾长/体重;相关性分析中能够区分三类虾的参数有体重、体长、腹尾长、第一尾节宽度、体长/体重、腹尾长/体重。综合分析认为,聚类分析是最佳统计学方法,体重、肥满度和第一尾节宽度/体长3个参数是最佳统计学参数。区分正常虾、正常幼虾和阻滞虾的参数标准为:雄性体重参数范围22.1668～25.1034、17.0517～17.6608和 13.4706～14.214,雄性肥满度参数范围 1.1598～1.2127、1.2541～1.2640 和 1.1274～1.1556,雄性第一尾节宽度/体长比值参数范围0.1294～0.1360、0.1363～0.1384和0.1435～0.1494;雌性体重参数范围 18.1526～19.9768、13.2198～14.0242 和 11.1046～11.9157,雌性肥满度参数范围1.1332～1.1563、1.1873～1.2075和1.1010～1.1107;雌性第一尾节宽度/体长比值参数范围 0.1327～0.1376、0.1392～0.1414 和 0.1415～0.1441。2)2015年8月采集的样本中,雄性阻滞虾20E水平显著低于正常虾(P<0.05),雌性阻滞虾20E水平显著低于正常虾和正常幼虾(P<0.05);雌性阻滞虾MIH水平显著高于正常虾和正常幼虾(P<0.05);雌雄阻滞虾MF水平均显著低于正常虾(P<0.05)。2016年6月采集的样本中,雄性阻滞虾20E水平显著低于正常虾和正常幼虾(P<0.05),雌性阻滞虾20E水平显著低于正常虾(P<0.05);雌雄阻滞虾MIH水平均显著高于正常虾和正常幼虾(P<0.05);雌性阻滞虾MF水平显著低于正常虾和正常幼虾(P<0.05)。3)2015年8月采集的样本中,雄性阻滞虾肝胰腺中的EcR mRNA表达量显著低于正常虾(P<0.05),MIH mRNA表达量显著高于正常虾和正常幼虾(P<0.05),RxRmRNA表达量显著低于正常虾和正常幼虾(P<0.05),雄性阻滞虾眼柄中的MIH mRNA表达量显著高于正常幼虾(P<0.05);雌性阻滞虾肝胰腺中的EcR mRNA表达量显著低于正常虾和正常幼虾(P<0.05),JHEH mRNA表达量显著高于正常幼虾,MIH mRNA表达量显著高于正常虾和正常幼虾(P<0.05)。2016年6月采集的样本中,雄性阻滞虾肝胰腺中的EcR和RxR mRNA表达量均显著低于正常虾和正常幼虾(P<0.05),GIH、MIH和JHEHmRNA表达量均显著高于正常虾和正常幼虾(P<0.05),雄性阻滞虾眼柄中的GIH和MIH mRNA表达量显著高于正常虾和正常幼虾(P<0.05);雌性阻滞虾肝胰腺中的EcR和RxRmRNA表达量显著低于正常虾和正常幼虾(P<0.05),GIH和MIH mRNA表达量显著高于正常虾和正常幼虾(P<0.05),JHEH mRNA表达量显著高于正常幼虾(P<0.05),雌性阻滞虾眼柄中的GIH和MIH mRNA表达量显著高于正常虾和正常幼虾(P<0.05)。4)2015年8月采集的样本中,雌性阻滞虾和正常幼虾眼柄中的EcR含量显著低于正常虾(P<0.05)。2016年6月采集的样本中,雄性阻滞虾肝胰腺中的EcR含量显著低于正常虾(P<0.05);雌性阻滞虾眼柄中的EcR含量显著低于正常虾(P<0.05)。以上结果表明,聚类分析、主成分分析和相关性分析均可区分生长阻滞罗氏沼虾,聚类分析是区分的最佳统计学方法,而体重、肥满度和第一尾节宽度/体长是区分生长阻滞罗氏沼虾的最佳参数;生长阻滞虾中20E和MF的含量较低,而MIH的含量较高;生长阻滞虾中EcR和RxR基因表达量和蛋白水平较低,而MIH基因表达量较高。说明阻碍罗氏沼虾生长的原因可能是EcR和RxR的表达量下降和MIH表达量升高降低了 20羟蜕皮激素和甲基法尼酯的水平、提高了蜕皮抑制激素水平所致。