【摘 要】
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目的急性心肌梗死（AMI）一直以来在世界范围内威胁着人类的生命健康,一旦发生心肌梗死（MI）,如何治疗以及预防不良并发症依然是未攻克的难关。胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）参与人类多种疾病的进程,包括过敏性疾病、慢性炎症性疾病以及肿瘤等,在各种免疫炎症调节和器官纤维化中发挥一定的作用,但其在心血管疾病中的研究甚少。本研究的目的是探索TSLP/TSLPR对心肌梗死后心功能和心室重塑的影响。方法（1
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目的急性心肌梗死（AMI）一直以来在世界范围内威胁着人类的生命健康,一旦发生心肌梗死（MI）,如何治疗以及预防不良并发症依然是未攻克的难关。胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）参与人类多种疾病的进程,包括过敏性疾病、慢性炎症性疾病以及肿瘤等,在各种免疫炎症调节和器官纤维化中发挥一定的作用,但其在心血管疾病中的研究甚少。本研究的目的是探索TSLP/TSLPR对心肌梗死后心功能和心室重塑的影响。方法（1）消化鼠尾提取DNA,利用聚合酶链式反应（PCR）和琼脂糖凝胶电泳法鉴定（TSLPR基因敲除）Crlf2-/-小鼠。（2）8周左右的Crlf2-/-小鼠和野生型C57BL/6小鼠通过结扎冠状动脉左前降支的方法制备心肌梗死模型,假手术（sham）组的结扎线仅穿过冠状动脉。术后第14天用超声心动图分别采用LV Trace法和辛普森（Simpson）法测量计算左室射血分数（EF）、左室短轴缩短率（FS）、左室舒张末期容积（LVEDV）和左室收缩末期容积（LVESV）,从而评估各组小鼠心功能的改变。（3）将C57BL/6小鼠随机分为7组,前两组分别为空白对照组和颈静脉注射100ul PBS/只的阴性对照组,后五组颈静脉注射AAV9-c Tn T-m TSLP病毒载体100ul/只,在小鼠心肌细胞特异过表达TSLP蛋白,病毒载体剂量依次为1、3、5、7、9*10^11vg/只,3周后用免疫印迹法（western blot）测量各组小鼠心脏左心室局部TSLP蛋白的表达,以确定能够达到过表达效果的合适注射剂量。（4）把C57BL/6小鼠随机分为以下各组1)过表达TSLP组:心梗术前2-3周颈静脉注射过表达TSLP的病毒载体,剂量定为5*10^11vg/只,100ul/只;2)阴性对照组:心梗术前2-3周颈静脉注射同前剂量100ul PBS/只;3)假手术组。做完心梗模型后第14天对所有小鼠进行超声心动图检测,亦分别使用LV Trace法和Simpson法测量计算EF、FS、LVEDV、LVESV值来评估小鼠心功能。结果（1）通过PCR可以准确鉴定Crlf2-/-小鼠。（2）LV Trace法和Simpson法测量的心脏超声均提示,与sham组相比,MI组野生型小鼠和Crlf2-/-小鼠的心功能均显著恶化,表现为EF、FS值降低,LVEDV、LVESV值升高;与野生型MI小鼠相比较,Crlf2-/-MI小鼠的心功能进一步恶化,表现为EF值显著下降,LVESV值显著升高;LVEDV值的显著升高仅出现在Simpson法测量的结果中。（3）确定小鼠颈静脉注射AAV9-c Tn T-m TSLP病毒剂量依赖性地显著升高心脏TSLP表达,且合适的载体剂量为5*10^11vg/只。（4）LV Trace法和Simpson法测量的心脏超声均提示,与sham组小鼠相比较,MI组野生型小鼠和过表达TSLP的小鼠EF、FS值降低,LVEDV、LVESV值升高,心功能显著恶化;而与野生型MI小鼠相比,过表达TSLP的小鼠MI后的心功能没有显著的改变,EF值仅略微升高,FS、LVEDV、LVESV值均无明显变化。结论（1）Crlf2-/-小鼠心梗后14天EF值下降,心脏收缩功能障碍,心功能恶化。（2）在成年野生型小鼠心肌细胞特异性过表达TSLP,心梗后14天心功能无明显变化,仅轻度改善。
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