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目的：细胞自噬作为一种新的细胞死亡方式被许多学者所研究,然而在激素性骨坏死发病机制的研究领域当中,糖皮质激素-地塞米松(以下简称激素)作用下的成骨细胞自噬情况及相关基因的表达情况的研究仍较少.特别是不同浓度激素、不同作用时间对离体成骨细胞影响的研究也鲜见报道,本文旨在探讨地塞米松作用离体成骨细胞的最低实验检测浓度,并探究激素在不同时间作用下成骨细胞自噬的情况以及相关基因表达的情况. 方法：离体培养兔成骨细胞,首先进行成骨细胞增殖率检测,明确地塞米松对离体成骨细胞产生影响的实验最低浓度,随后选择合适浓度,在地塞米松作用12h、24h、48h、72h后,首先通过单丹磺酰尸胺(MDC荧光染色)特异性检测不同作用时间下,成骨细胞自噬的情况,然后通过实时定量荧光PCR和Western Blot检测自噬相关基因自噬相关基因5(Atg5)与微管相关蛋白1轻链3(MAP1LC3)的mRNA和蛋白表达情况.应用SPSS13.0进行数据的统计分析,统计学分析采用方差分析及LSD-t检验,p<0.05视为具有统计学差异. 结果：1、地塞米松影响成骨细胞增值率的最低作用浓度应大于10-8mol/L.2、地塞米松作用离体成骨细胞12h、24h、48h、72h后,平均荧光强度分别增加到0.18、0.22、0.25、0.28.较对照组0.11具有明显统计学差异(p<0.05).3、在地塞米松浓度为10-6mol/L,成骨细胞Atg5与LC3的mRNA表达在激素作用12h、24h、48h、72h的RQ值分别为Atg5：1.55、1.70、2.06、2.96;LC3：1.22、1.67、1.81、2.01,组间比较具有统计学差异(p<0.05).4、Atg5与LC3的蛋白表达在激素作用12h、24h、48h、72h的平均灰度值比值比分别为Atg5：0.51、0.64、0.66、0.72;LC3：1.08、1.20、1.35、2.04,组间比较具有统计学差异(p<0.05). 结论：本实验通过研究地塞米松对离体成骨细胞自噬的影响,得出以下结论1.本实验证实激素可以诱导成骨细胞自噬;2.激素作用离体成骨细胞实验的最佳检测浓度应大于10-8mol/L,浓度为10-6mol/L的情况下,随着地塞米松作用时间的增加,离体成骨细胞的自噬发生逐渐增多;3.随着自噬增多,Atg5及LC3随着激素作用时间的增加,表达逐渐增多;4.过度的细胞自噬可能是引起SANFH的重要风险因素之一;5.本实验为以后的研究提供了实验基础,同时通过证实细胞自噬延长阶段基因的高表达为激素性骨坏死发病机制的进一步研究与疾病的防治提供理论基础.