利用自然界广泛存在的木质纤维原料生产生物乙醇,作为新能源进行利用是现在世界各国正在攻关的课题之一。将木质纤维原料转化为生物乙醇的过程分为原材料的预处理,酶解,发酵和乙醇蒸馏阶段。预处理阶段的目的是破坏阻碍酶解糖化的生物质结构,使纤维素与生物酶能够充分接触,进而取得良好的水解效果。然而,预处理之后物料中的残留木质素会在酶解过程中对纤维素酶产生吸附作用,影响纤维素酶解效率。研究预处理对木质素吸附纤维素酶的影响,是一个重要的研究方向。本论文利用提取自不同预处理方法前后的纤维素酶解木质素和草酸青霉JU-A10-T发酵的酶液,通过研究预处理前后木质素的结构性质变化与对纤维素酶吸附能力之间的关系,在分别经过稀酸预处理、碱预处理和亚硫酸盐预处理之后发现,稀酸预处理主要使玉米秸秆的半纤维素发生降解,碱预处理中,木质素发生部分降解,但亚硫酸盐预处理时,木质素和半纤维素都发生了降解。同时,预处理对材料中木质素的结构的影响也会有差异。在稀酸预处理过程中木质素发生了缩合；碱预处理过程中木质素主要发生了降解；亚硫酸盐预处理之后,木质素发生了移位降解。另外,本文还利用草酸青霉菌种A10-T发酵生产的纤维素酶粗酶液与从不同方法预处理之后的玉米秸秆中提取的木质素进行吸附实验。发现提取自稀酸预处理后的玉米秸秆中的木质素,对纤维素酶的吸附作用比碱性预处理和亚硫酸盐预处理后原料中的木质素吸附能力要强,而未处理秸秆中木质素的吸附能力相对较弱。经过蛋白质相关分析发现,不同预处理后秸秆中提取的木质素,对纤维素酶液中不同分子量的酶蛋白的吸附效果也有差异,但所有木质素样品吸附比较明显的纤维素酶蛋白都集中在25-70KDa左右。不同预处理秸秆样品中的木质素与纤维素酶作用后,对纤维素酶各酶活力的影响情况各不一样。就本文使用的木质素样品而言,吸附后酶液中外切葡聚糖酶的活力降低最大,其次为内切葡聚糖酶,但对木聚糖酶和p-葡萄糖苷酶的影响稍有差异。稀酸预处理后秸秆样品中木质素对各种纤维素酶的影响最强,其次是亚硫酸盐预处理木素,最弱的是没有经过预处理的木质素。结合粗酶液和部分纯化之后的蛋白样品的双向电泳,对电泳胶进行蛋白质点统计,发现木质素对纤维素酶的吸附作用主要集中在CBH、EG、Xyn三大种酶上。而不同的木质素,对不同纤维素酶种类的吸附量也不一样。从未经任何预处理的玉米秸秆中提取的木质素主要吸附木聚糖酶和EG。从经过稀酸预处理玉米秸秆中提取的木质素和从经过碱预处理玉米秸秆中提取的木质素均对CBH和木聚糖酶以及EG主要吸附。从经过亚硫酸盐预处理玉米秸秆中提取的木质素除了主要吸附CBH、EG、木聚糖酶三种酶以外,对葡萄糖淀粉酶的吸附也非常强烈。这些数据的研究为寻找有效控制酶解过程中木质素影响的方法打下了基础。