MAPK信号通路及SPAG9在孕裸鼠宫颈癌皮下移植瘤的表达水平的研究

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目的建立孕裸鼠宫颈癌皮下移植瘤模型,探讨孕裸鼠宫颈癌移植瘤组织中MAPK信号通路活化水平及SPAG9(抗精子抗体)的表达变化及其相关性。方法选择健康雌性裸鼠,交配成功后,随机将孕裸鼠分成2组,实验组10只,对照组10只,采用右腋皮下接种法。实验组接种人宫颈癌HeLa细胞,对照组接种同体积生理盐水,观察孕裸鼠生长状态及肿瘤的生长情况。接种14天后处死裸鼠,完整剥离肿瘤,HE染色观察肿瘤细胞形态,采用蛋白免疫印迹(Western blot)技术检测实验组和对照组接种组织中SPAG9蛋白和MAPK信号转导通路中ERK1/2、JNK1/2和P38磷酸化水平。采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time fluorescencequantitative PCR,RQ-PCR)检测实验组和对照组接种组织中SPAG9mRNA的表达水平。结果1.孕裸鼠人宫颈癌HeLa细胞株单细胞悬液(2×106个/只)右腋皮下接种成瘤率100%。2.实验组皮下移植瘤组织中p-ERK1/2、p-JNK1/2、p-P38表达水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。3.实验组皮下移植瘤组织中p-ERK1/2与p-JNK1/2表达水平呈正相关(r=0.674,P<0.05),均与p-P38表达无相关性(r分别为0.577、0.270,P>0.05)。4.实验组皮下移植瘤组织中SPAG9mRNA相对表达量及SPAG9蛋白表达量均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。5.实验组皮下移植瘤组织中SPAG9mRNA相对表达量与p-ERK1/2、p-JNK1/2表达水平呈正相关(r分别为0.649、0.986,P<0.05),与p-P38表达水平无相关性(r=0.312,P>0.05)。实验组皮下移植瘤组织中SPAG9蛋白表达量与p-ERK1/2、p-JNK1/2表达水平呈正相关(r分别为0.798、0.883,P<0.05),与p-P38表达水平无相关性(r=0.317,P>0.05)。结论1.孕裸鼠HeLa细胞皮下注射可成功建立孕裸鼠宫颈癌皮下移植瘤模型。2.SPAG9基因可能主要通过参与JNK通路参与MAPK信号通路的调节。3.SPAG9基因表达上调可能激活MAPK信号通路,从而参与孕裸鼠宫颈癌的发生发展。
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