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极低密度脂蛋白受体(very low density lipoprotein receptor,VLDLR)属于低密度脂蛋白受体(LDLR)超家族的一员,其结构由五部分组成。该受体存在第16个外显子(编码胞外O-linked糖链结合域)的选择性剪接,从而产生不同的亚型:含有O-linked糖链结合域的Ⅰ型受体;O-linked糖链结合域缺失的Ⅱ型受体。 过去认为,VLDLR的功能主要是摄取富含apoE的脂蛋白而参与甘油三酯(TG)的代谢,但近来对其功能有了新的认识:VLDLR不仅参与脂质的代谢,还可以结合多种配体,介导多种信息分子的跨膜转运及信号转导,从而产生多种生物学效应:如在神经细胞通过与信号分子Reln结合影响发育过程中的神经细胞的迁移和定位;与组织因子途径抑制剂(TFPI)相互作用进行信号转导,以抑制细胞增殖;与uPA/PAI-1结合,在肿瘤细胞的浸润与转移中发挥作用;还可影响细胞的生长和分化。故VLDLR被称为是类似于瑞士军刀一样的多功能受体。但是对两型受体的功能差异,特别是Ⅱ型受体的独特功能及其生物学意义的研究却罕见报道。 两种VLDLR亚型的分布具有明显的组织细胞特异性:Ⅰ型受体主要分布于心脏和肌肉等组织;Ⅱ型受体主要分布于非肌肉组织,如肾脏、脾脏、肾上腺、睾丸、子宫、卵巢以及胚胎等。而且受体亚型的表达与分布在不同生理或病理情况下可发生改变。由此推断:两型VLDLR的分布特点可能与其各自的独特功能相关,与细胞的功能、机体的生理、病理状态相适应。 VLDLR主要功能是结合富含apoE的脂蛋白而参与甘油三酯的代谢,与动脉粥样硬化的病理过程密切相关。胰岛素是一种主要调节糖代谢的激素,其在体内分泌异常时可引起多种代谢性疾病:如糖尿病、代谢综合征等;胰岛素也可影响脂类代谢,因此可能会影响VLDLR在代谢性疾病中的功能。文献报道:胰岛素可上调人体滋养层绒毛膜癌细胞中VLDLR mRNA的表达。进一步证实胰岛素会影响VLDLR整体的表达,但是其对VLDLR亚型表达的调节尚不清楚,这可能成为其调节的一个重要方面。因此,为了探讨胰岛素对VLDLR亚型表达的影响及VLDLR亚型各自在代谢性疾病的发生中可能的功能,本实验首先制备VLDLR单克隆抗体,然后用胰岛素与胃腺癌细胞SGC7901孵育不同时间及不同浓度后后,采用Western Blotting技术,分别观察VLDLR亚型在蛋白质水平的表达变化,结果表明:与正常状态相比,在一定时间范围内,胰岛素可使VLDLRⅠ型表达明显下调,Ⅱ型表达明显上调,以6h最为明显,且Ⅱ型与Ⅰ型的比值逐渐升高。随着浓度增加,胰岛素可使VLDLRⅠ型表达明显下调,Ⅱ型表达明显上调,以4.5μmol/L的浓度最为明显,且Ⅱ型与Ⅰ型的比值逐渐升高。可见,胰岛素可以调控VLDLR亚型的表达,使受体Ⅰ型表达下调,Ⅱ型表达上调;且此调控具有一定程度的时间依赖性和浓度依赖性。 总之,本次研究首次从体外探讨胰岛素对VLDLR亚型表达变化的影响,为进一步研究VLDLR亚型在各种病理生理状态下的功能差异奠定了一定的研究基础,也为代谢性疾病相关研究奠定了一定基础。