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结构脂是由中碳链脂肪酸三甘酯与不饱和长碳链脂肪酸三甘酯进行酯交换生成的新一类油脂,合成结构酯的目的是优化脂肪底物混合物,利用每一种脂肪酸的功能和特性,使合成的结构脂拥有更多的优点。本课题首先筛选了各种载体,选择弱碱性阴离子交换树脂D301-G树脂作为固定化猪胰脂肪酶的载体,并且确定了D301-G作为固定化载体的优化条件:在13℃的摇床中,吸附时间为8h,给酶量为127IU/g,戊二醛浓度1%,交联时间10min,得到固定化酶活为28.0 IU/g(平均值)。 用NOVO公司提供的固定化脂肪酶lipolase催化卵磷脂和橄榄油的酯交换反应,并且考察温度、时间、酶活、底物浓度比、水分等因素,设计正交实验,得到lipolase催化卵磷脂和橄榄油酯交换反应的优化条件:在100mL烧瓶中,反应溶剂是20mL正己烷,恒温水浴温度45℃,反应时间12h,酶活是4.1U/mL(即加lipolase脂肪酶3.0mg),底物浓度比1∶4,加20μL水。用气相色谱分析得到的产物卵磷脂中亚油酸和油酸的总含量为59.92%。 同样利用制备的固定化酶D301-G来卵磷脂和橄榄油的酯交换反应,考察同样的条件,得到D301-G催化卵磷脂和橄榄油酯交换反应的优化条件:在100mL烧瓶中,反应溶剂是20mL正己烷,恒温水浴温度为45℃,反应时间24h,酶活是10.5U/mL(即加7.5g固定化脂肪酶D301-G),底物浓度比1∶3,加20μL水。分析得到的产物卵磷脂中亚油酸和油酸的总含量为79.87%。 再用lipolase催化卵磷脂和鱼油的酯交换反应,用相同的方法得到这个反应的优化条件:在100mL烧瓶中,反应溶剂是20mL正己烷,恒温水浴温度45℃,反应时间12h,酶活是6.9U/mL(即加lipolase脂肪酶5.0mg),底物浓度比1∶4,加20μL水。得到的产物卵磷脂中含有EPA为1.40%,DHA为5.43%,总的EPA/DHA的含量为6.83%,而固定化酶D301-G对这个催化这个反应没有效果。 合成的EPA/DHA型卵磷脂使其氧化稳定性增强。并且磷脂分子形态可以原封不动地由细胞摄取,在细胞内分解为DHA、EPA与磷脂,显示出增效作用,所以可以作为食品、化妆品、药品来利用。