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背景和目的在全世界范围内,子宫颈癌(cervical cancer)是女性第四位常见的恶性肿瘤。研究表明,每年有超过52万人被诊断为宫颈癌,26万余人死于宫颈癌,其中发展中国家贫穷地区占大部分[1],近年来宫颈癌的发病率逐渐上升,且有年轻化趋势[2],其中宫颈鳞状细胞癌占75-80%。高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染已被公认是宫颈癌及其癌前病变的主要病因[3]。由于人体具有完整的自身免疫系统,大部分女性感染HPV为一过性感染,只有持续性感染HPV才可能导致宫颈发生病变,甚至是宫颈癌。高危型HPV持续感染引起细胞因子介导的肿瘤免疫微环境受抑制,从而导致宫颈癌的发生。肿瘤免疫以细胞免疫为主,尤其是T细胞,在抗肿瘤免疫应答中发挥着免疫调节、免疫监视等重要作用[4]。根据不同的功能,T细胞分为辅助性T细胞(Th细胞)、细胞毒性T细胞(cytotoxic T cell,CTL或Tc)和调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)。Th细胞在人体免疫中发挥重要作用,可分泌不同的细胞因子,发挥不同的免疫效应,其中,Th1细胞和Th2细胞分泌的细胞因子分别在细胞免疫和体液免疫应答中发挥重要作用。白细胞介素-2(IL-2)由Th1淋巴细胞受分裂原或抗原刺激后产生,在维持机体正常的T细胞免疫中起重要作用,可通过其增殖介导成熟性T细胞克隆扩增,从而影响细胞毒性T细胞的功能。可促进T细胞杀伤作用,增强淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)、自然杀伤细胞及细胞毒性T淋巴细胞对病原体的杀伤活性。干扰素-γ(IFN-γ)是由CD4+Th1细胞、自然杀伤细胞和其他淋巴细胞产生的一类在宿主免疫和炎症反应中的重要介质,可增加T细胞细胞毒性和NK细胞活性,增强细胞免疫应答。通过诱导宿主细胞产生数种酶,干扰病毒的基因转录或病毒蛋白组分的翻译,从而清除病毒感染。白细胞介素-4(IL-4)是由Th2细胞分泌,促进Th2细胞分化,上调血管内皮因子1的表达,活化肥大细胞和嗜酸粒细胞,在变态反应中起关键作用。IL-4通过拮抗巨噬细胞的γ干扰素活性作用抑制细胞介导的免疫反应。多项研究显示在肿瘤患者血清中存在Th1细胞和Th2细胞亚群失调(Th1/Th2漂移),主要表现为Th1细胞功能降低,Th2细胞功能增强,提示机体的抗肿瘤免疫受到损害。研究表明[5]不论是正常女性还是下生殖道感染患者,阴道灌洗液中均可检测到细胞因子的存在。Audirac-Chalifour等[6]研究结果显示宫颈癌的发生发展与阴道菌群失调和异常的宫颈局部细胞因子表达有关。宫颈癌患者血清中细胞因子表达异常,提示机体全身免疫失调,宫颈局部细胞因子失衡提示局部免疫受抑制,血清及阴道灌洗液中细胞因子紊乱有无关系,却未见报道,关系如何尚不清楚。本研究应用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定宫颈癌患者、宫颈癌前病变患者及宫颈炎患者血清、阴道灌洗液中IL-2、IL-4、IFN-γ的表达,分析三种细胞因子与宫颈癌的临床病理联系及在宫颈癌患者体内辅助性T细胞功能的表达;通过分析细胞因子在血清及阴道灌洗液中的表达有无相关性,推测二者之间的关系。本研究将揭示宫颈癌患者中异常的免疫反应,这可能是导致癌发生、发展的机制之一。纠正宫颈局部微环境紊乱可能成为一种治疗宫颈癌的新思路。材料与方法收集2015.06-2016.03在郑州大学第一附属医院妇科就诊的6例宫颈炎,13例LSIL,15例HSIL,27例宫颈鳞癌I-II期,6例宫颈鳞癌III-IV期患者的血清及阴道灌洗液。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清、阴道灌洗液中IL-2、IL-4、IFN-γ的含量。结果1.在血清中,IL-2的表达随着宫颈恶变程度增加而逐渐降低,在LSIL中和宫颈炎组表达无明显差异(P=0.288),其余各组间差异均有统计学意义(P<0.05);IL-4的表达随着宫颈恶变程度增加而逐渐升高,在LSIL中和宫颈炎组表达无明显差异(P=0.768),其余各组间差异均有统计学意义(P<0.05);IFN-γ的表达随着宫颈恶变程度增加而逐渐降低,各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。2.在阴道灌洗液中,IL-2的含量随宫颈恶变升级逐渐降低,各组间差别均有统计学意义(P<0.05);IL-4的含量随宫颈恶变程度升级逐渐增多,各组间差别均有统计学意义(P<0.05);IFN-γ的表达随着宫颈恶变严重程度增加逐渐降低,在LSIL中和宫颈炎组表达无明显差异(P=0.177),其余各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。3.IL-2、IL-4、IFN-γ三种细胞因子在宫颈癌患者血清及阴道灌洗液中的表达均有相关性,相关系数分别为r=0.809、0.722、0.781。结论1.宫颈癌患者血清中IL-2、IFN-γ减少,IL-4增多,提示Th1/Th2漂移,宫颈癌患者全身免疫受抑制,可能促进了宫颈癌的发生发展。2.宫颈癌患者阴道灌洗液中IL-2、IFN-γ减少,IL-4增多,提示Th1/Th2漂移,宫颈黏膜免疫受抑制,可能导致宫颈持续HPV感染,引起局部癌变。3.细胞因子在宫颈癌患者血清及阴道灌洗液中表达具有相关性,纠正宫颈局部微环境紊乱可能为治疗宫颈癌提供了新思路。