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水稻齿叶矮缩病是由水稻齿叶矮缩病毒(rice ragged stunt virus,RRSV)引起的病害,它在水稻分蘖前期发病会引起稻株无法抽穗;分蘖后期发病会导致稻株生长速度减慢,抽穗不完全,谷粒不充实,严重影响稻米产量,是我国及其他东南亚国家一种重要的水稻病害。RRSV属于呼肠孤病毒科(Reoviridae),水稻病毒属(Oryzavirus),主要由水稻害虫褐飞虱以持久性增殖方式传播。RRSV含有10条dsRNA,共编码11种蛋白,包括8种结构蛋白和3种非结构蛋白。其中S10片段编码的蛋白Pns10,参与病毒复制工厂(病毒原质)的形成。有研究表明RRSV在Pns10缺失的情况下无法形成正常复制工厂,从而导致病毒复制、侵染、传播能力下降。研究Pns10与褐飞虱的蛋白互作,揭示病毒在侵染和复制过程中与宿主之间的相互作用机理,有助于防治水稻齿叶矮缩病。本研究利用酵母双杂交技术,成功构建了褐飞虱全虫的酵母文库,筛选出与Pns10 互作的 MD-2-related lipid-recognition protein(ML)、Sorting and assembly machinery component50(SAM50)、Calpain-7-like 等 11 个宿主蛋白。利用 GST pull-down技术,进一步验证了 Pns10与ML之间的互作关系。通过RNA干扰技术,发现NlML对褐飞虱的龄期发育有一定的影响,注射dsNlML后,褐飞虱发育迟缓,部分不能正常进入下一龄期,我们推测该基因可能参与昆虫的蜕皮过程。我们将NlML干扰后的褐飞虱接种到带有RRSV病毒的水稻苗上饲养,并通过实时荧光定量PCR测定病毒在褐飞虱体内的增殖情况。结果表明,注射dsNlML后,褐飞虱在第4-6天体内的病毒量显著高于对照组。由于ML是TOLL免疫通路的重要组成部分,我们推测ML通过调控昆虫TOLL免疫通路进而影响病毒的复制增殖。当NlML被干扰后,昆虫的免疫系统无法识别入侵的病毒,从而导致病毒量升高。