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目的:探讨高迁移率族蛋白-1(HMGB1)体外对健康人与系统性硬化症(SSc)患者皮肤成纤维细胞活化及Ⅰ型胶原(ColⅠ)、纤连蛋白(Fn)表达的影响。 方法:采用原代组织块培养法,培养健康人与SSc患者皮肤成纤维细胞,形态学及波形蛋白免疫细胞化学法鉴定,选取第4-6代细胞进行实验。予以不同终浓度的HMGB1处理皮肤成纤维细胞24、48、72h,采用MTT法观察皮肤成纤维细胞的增殖情况;予以终浓度为0.5μ g/ml的HMGB1处理皮肤成纤维细胞48h,0μ g/ml的HMGB1为对照组,Western-Blot法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白的表达;Real-Time PCR法检测ColⅠ及Fn的mRNA表达。 结果:1.两组细胞形态相似,波形蛋白免疫细胞化学法阳性鉴定为成纤维细胞;2.不同终浓度的HMGB1刺激成纤维细胞24、48、72h后,MTT结果提示HMGB1终浓度为0.5μ g/ml时,轻度抑制健康人皮肤成纤维细胞增殖,而对SSc患者组成纤维细胞则无影响;3.Western-Blot结果提示HMGB1刺激健康人与SSc患者皮肤成纤维细胞后α-SMA蛋白的表达均较对照组增加(p<0.05),SSc患者α-SMA蛋白表达量高于健康人(p<0.01);4.Real-Time PCR结果提示HMGB1刺激后SSc患者皮肤成纤维细胞ColⅠ及Fn mRNA的表达较对照组增加(p<0.05)。 结论:1.HMGB1可以诱导健康人与SSc患者皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞转化;2.HMGB1可以诱导SSc患者皮肤成纤维细胞合成ColⅠ以及Fn增多,但对健康人皮肤成纤维细胞无明显影响,提示HMGB1可能参与了SSc皮肤纤维化的过程。