肝脏是体内功能最多、最复杂的脏器，是一个物质合成、代谢与代谢调节的场所，是生理和病理状态下，能量代谢、毒素的生物转化以及血浆蛋白质合成的中心器官，是机体最重要的器官之一。肝脏作为机体重要的代谢器官，一直倍受关注，但由于体内研究受众多因素的影响，因而肝细胞培养作为一种体外研究手段，越来越多地被应用。由于肝细胞是一种分化程度很高的细胞，一旦失去体内生存环境，则很快失去分化再生的能力，它的一些生化功能也很快丧失。目前，多采用原代肝细胞培养技术，主要由于原代肝细胞在一定条件下，在短期培养期间还具有体内肝细胞的一些功能及活性，也能最接近和反映体内生长特性。因此，原代肝细胞培养技术具有重要意义。 在原代小鼠肝细胞分离及培养的试验中，采用植块培养和分离细胞培养两种分离、培养肝细胞的方法，通过体外培养比较，发现植块培养法分离得到的肝细胞数量较低；该法多适用于新生动物或动物胚胎肝细胞培养，其优点是操作简单、经济，一般实验室易于开展。分离细胞培养法能够获得大量细胞形态完整、肝功能较强的肝细胞；该法具有分离效果好、操作简单、酶价格便宜等特点。通过对体外培养肝细胞供体小鼠性别和年龄的研究比较，结果表明从雌性壮龄小鼠获取的肝细胞，即时存活率高，分离难度较低，细胞增殖能力较强，同时保持着较高的肝功能(Urea的合成量)，更适于体外长期或短期培养研究。 肝细胞培养条件特殊，不能采用常规血清浓度培养基，多采用无血清或低血清培养液。在小鼠肝细胞无血清培养条件的研究试验中，采用在基础培养基RPMI1640中添加大豆发酵液成分的方法，通过对发酵液离心速度、离心时间、添加量及合成培养液pH四因素的综合试验、分析，确定最优培养条件为：离心速度1500r/min，离心时间5min，添加量20％，培养液pH7.20。在此培养条件下培养的肝细胞与含血清培养条件进行同期培养对照，从生长曲线来看，所设计的培养液能够提供肝细胞体外培养所需的营养成分；从Urea和Alb检测结果来看，培养的肝细胞是具有一定生物学特性及功能的肝细胞；从肝细胞形态可以看出，该培养液培养的肝细胞具有其形态学特征。肝细胞体外培养时，通过添加一些基质，以改善细胞生长表面极性，促使肝细胞快速贴壁、进入生长期。在小鼠肝细胞培养基质的探索试验中，以自制猪皮胶原、添加琼脂作为培养载体。试验结果表明：该胶原基质能够促进细胞贴壁、生长，而且细胞培养环境相对稳定；Urea检测结果也表明在该基质上培养的肝细胞具有良好的肝功能。 本试验在肝细胞体外培养、研究及应用等方面具有一定意义。