【摘 要】
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本论文以图位克隆方法定位一个水稻类病斑突变体基因Spl1;以反向遗传学方法对拟南芥类病斑基因LSD1的水稻同源基因OsLSD1进行了功能分析。 本文采用图位克隆的方法定位
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本论文以图位克隆方法定位一个水稻类病斑突变体基因Spl1;以反向遗传学方法对拟南芥类病斑基因LSD1的水稻同源基因OsLSD1进行了功能分析。
本文采用图位克隆的方法定位了Spl1基因,获得了10个与Spl1基因连锁的CAPS分子标记,利用这些CAPS标记以及它们在3202个体组成的分离群体中的遗传连锁关系,绘制出一个高分辨率的遗传图谱,同时构建了由4个日本晴BAC克隆组成的跨叠重叠群,将Spl1基因定位在一个423kb区域。对七个Spl1等位基因突变体的分子分析将Spl1基因缩小到标记Al951a和Al874a之间的70kb范围,BAC克隆OJ1111C09和OSJNBb0077C18覆盖该区域。
本文从水稻中分离了一个类LSD1基因OsLSD1,其表达受光照诱导或黑暗抑制。OsLSD1的反义抑制引起转基因水稻产生类病斑表型,伴随PR-1基因的组成型表达,并加速了对无毒稻瘟病菌的HR反应。在水稻中过量表达OsLSD1能促进愈伤分化,提高叶绿素b的含量。正义和反义转基因水稻植株对毒性稻瘟病小种的抗性都显著增强。另外,在烟草中过量表达OsLSD1提高了对PCD-诱导剂FB1的耐受性。OsLSD1-GFP融合蛋白分布在转基因烟草BY-2悬浮细胞的细胞核中。我们的结果表明OsLSD1是植物PCD的负调节子和愈伤分化的正调节子。
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