目的：胰腺癌已成为一种严重危害人体健康的疾病，近年来在西方国家它的致死率已位居第四位[1]。Wnt5a是细胞自分泌型蛋白，最近研究表明Wnt5a的过度表达与恶性肿瘤的各种生物学特性及较差的临床治疗效果有着密切的联系[2]，其表达在不同的肿瘤具有差异性，该项目中，我们对部分胰腺癌组织进行了Wnt5a表达量的检测，并对Wnt5a在胰腺癌细胞系中的表达及功能进行分析，发现JNK/Paxillin可以被Wnt5a磷酸化进而调节肿瘤细胞的迁移，同时Wnt5a还可以通过调节黏着斑蛋白和细胞粘附相关分子的表达影响黏着斑的形成及功能，这些分子包括ICAM，CD44和MMPs等。本文的研究为揭示Wnt5a非经典信号通路在胰腺癌发生发展过程中所起的作用，以及Wnt5a是否可以作为胰腺癌转移早期诊断蛋白标志物以及治疗新的靶点提供了理论基础。　　 方法：取人胰腺癌肿瘤及癌旁标本利用RT-PCR及Western blot对比检测Wnt5a，p-JNK以及p-Paxillin的表达量差异。在体外细胞系中，选取PANC1，Capan-2以及HT1080三株细胞系进行实验，首先进行Wnt5a敲除实验，通过Western blot验证敲除效果，并检测下游基因JNK/p-JNK的表达情况，然后选取人胰腺癌细胞系Capan-2进行后续实验，敲除JNK或者抑制JNK活性以检测其下游桩蛋白Paxillin/p-Paxillin的表达及活化情况，对JNK/Paxillin等相关磷酸化位点功能进行检测，我们在检测基因和活性变化的同时还对细胞迁移、增殖及凋亡变化进行了测定。为证实Wnt5a影响黏着斑的形成，我们进行了免疫共沉淀实验，筛选出桩蛋白中影响其募集接头蛋白功能的关键磷酸化位点，并应用RT-PCR技术检测Wnt5a非经典信号通路对相应细胞黏附相关小分子蛋白的表达影响。　　 结果：通过对肿瘤及癌旁标本的检测，我们发现肿瘤组织中的Wnt5a，以及磷酸化的JNK，Paxillin所占比例明显高于癌旁组。在对相应细胞系进行敲除实验后，我们发现Wnt5a能够磷酸化JNK进而活化Paxillin影响细胞迁移，而当JNK被敲除或者活性被抑制时，即使存在Wnt5a的刺激的情况下，Paxillin的活化和细胞迁移均不受影响，因此，我们确信在胰腺癌肿瘤当中Wnt5a是通过JNK/Paxillin通路发挥作用，直接诱发了胰腺癌细胞的迁移。在观察Paxillin募集黏着斑相关小分子蛋白及接头蛋白时，我们发现S178通过Y31和Y118的活化调节黏着斑的形成，同时他们的磷酸化对接头蛋白，细胞骨架蛋白与桩蛋白的结合起着关键作用。　　 结论：Wnt5a诱发胰腺癌转移，其作用机制为Wnt5a活化了JNK/Paxillin非经典信号通路引起胰腺癌细胞迁移；Wnt5a通过对桩蛋白特定位点磷酸化，募集黏着相关蛋白及接头蛋白，调节黏着斑的构成；Wnt5a/JNK调节相关分子，影响细胞-细胞间与细胞-基质的粘附、肿瘤细胞的上皮间质转型和细胞外基质的降解，进而调节细胞的运动。本文为Wnt5a作为胰腺癌转移早期诊断蛋白标志物以及治疗新的靶点提供了理论基础。