【摘 要】
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由稻瘟菌引起的稻瘟病是水稻生产中最为严重的真菌病害,研究稻瘟菌与水稻的互作,揭示其致病及抗性机理,对保障粮食安全具有不容忽视的意义。植物对病原菌的免疫反应主要分为PTI和ETI,Avr效应蛋白直接或间接被R蛋白识别继而产生的HR反应被称为ETI。基于本课题组已有的研究基础,本文第一部分以稻瘟菌无毒效应蛋白AvrPi9为诱饵,筛选水库cDNA文库并钓得了其在水稻中的多个候选互作蛋白;通过酵母双杂、G
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由稻瘟菌引起的稻瘟病是水稻生产中最为严重的真菌病害,研究稻瘟菌与水稻的互作,揭示其致病及抗性机理,对保障粮食安全具有不容忽视的意义。植物对病原菌的免疫反应主要分为PTI和ETI,Avr效应蛋白直接或间接被R蛋白识别继而产生的HR反应被称为ETI。基于本课题组已有的研究基础,本文第一部分以稻瘟菌无毒效应蛋白AvrPi9为诱饵,筛选水库cDNA文库并钓得了其在水稻中的多个候选互作蛋白;通过酵母双杂、GST Pull-down等实验手段在体内与体外验证了AvrPi9与多个APINs的互作;其次,对其中APIN1-RNAi转基因植株的基因型及表型进行了鉴定,初步明确了其与稻瘟病抗性的相关性。该部分结果为研究AvrPi9进入水稻体后的具体生理生化作用提供了线索,为解析稻瘟菌与水稻的互作提供了新的证据。tRNA是一类长度大约为75nt左右的非编码RNAs,众所周知,其在蛋白翻译合成过程中起着至关重要的作用。RNaseP是一类保守的内源剪切酶,它可以去除tRNA前体的5’序列,对tRNA成熟必不可少。本文第二部分研究并确定了水稻RNase P的p30亚基（Rpp30）与水稻组蛋白去乙酰化酶HDT701之间的互作,通过Rpp30的OX与RNAi转基因植物基因型及抗病表型鉴定等实验证明了 Rpp30与水稻抗病反应的正相关性;同时在Rpp30蛋白N端保守功能结构中鉴定到了3个乙酰化修饰位点,为HDT701与Rpp30互作并调控其修饰水平提供了有力证据;综上所述,该部分实验结果初步揭示了 Rpp30与HDT701互作后共同调控水稻先天免疫反应的作用机理,丰富了tRNA生物学功能在水稻抗病及植物免疫方面的认识。
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