甜菜遗传转化及转AtNHX1基因植株的再生

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该文采用农杆菌介导的遗传转化技术,将该基因导入甜菜丛芽细胞,并再生出转基因植株.从糖用甜菜呼甜207、甘糖1号、KWS9306及饲用甜菜52-028、49-863和29-975的幼胚、下胚轴、幼嫩花序及实生苗顶芽等外植体诱导丛生芽,发现外植体来源及基因型对丛生芽诱导率均有影响.其中,幼嫩花序的诱导率最高,达70﹪-80﹪;最低的是不胚轴,频率为0.基因型不同的外植体发生丛生芽的时间及丛生芽增殖率均有所不同.以芽尖为受体,用带用AtNHX1基因的农杆菌进行浸染,共培养之后用10MG/L潮霉素连续筛选三代.夏活芽尖经抑菌培养后,继代培养到2-3CM高时诱导生根,生根频率因基因型及所使用的抗生素不同而有明显差异.经潮霉素筛选存活的小苗进行PCR检测,其阳性频率为10.5﹪左右.对部分PCR阳性植株进行PCR-Southernblotting,结果为阳性.
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