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研究背景:Ⅲ型前列腺炎（CP/CPPS）是最为常见的前列腺炎类型[1]。其临床表现为长期、反复的骨盆区域疼痛或不适,持续时间超过3个月,可伴有不同程度的排尿症状和性功能障碍。根据前列腺液或前列腺按摩后尿液中白细胞数目升高或正常,可分为ⅢA型或ⅢB型[2]。部分CP/CPPS患者临床治疗效果欠佳,症状易反复发作。目前CP/CPPS病因不明确,多种因素牵涉其中,近来大量的研究表明,炎症与免疫因素在疾病的发生、发展中发挥着重要作用[1,3]。外泌体（exosome）是细胞分泌的小囊泡,直径约30150 nm,广泛存在于血液、尿液、唾液、脑脊液等体液中。外泌体具有双层质膜结构,表面富含胆固醇、神经鞘磷脂、神经酰胺等脂类物质,其内载有蛋白质、mRNA、microRNA等生物信息分子,是细胞间信息传递的重要工具,由细胞通过胞吐作用释放至细胞外隙或生物学体液中,可以与周围或远处靶细胞相互作用,发挥相应的生物学效应[4,5]。在炎症、肿瘤等情况下,细胞外泌体的分泌量会大大增加。目前研究表明外泌体在炎症及免疫性疾病中发挥着重要作用,作为细胞间的信息传递者,它具有促炎作用,可以刺激正常细胞分泌炎症相关因子,使炎症扩散,疾病进展[6,7]。由此我们认为在Ⅲ型前列腺炎中,外泌体可能通过炎症相关信息的传递,促进炎症反应发生,在疾病的发生、发展中发挥重要作用。本课题拟从ⅢA型前列腺炎患者及正常人,前列腺液及前列腺按摩后尿液中提取外泌体,比较两者之间数量的差异,再通过研究外泌体作用于前列腺基质细胞,观察细胞炎症因子的产生,进一步揭示外泌体在ⅢA型前列腺炎中的可能作用。方法:1、采用超速离心法分离ⅢA型前列腺炎患者及正常人,前列腺液及前列腺按摩后尿液中的外泌体。用透射电镜、WB及激光粒度仪等对外泌体进行鉴定。2、采用BCA法测定外泌体蛋白含量,使用外泌体测量试剂盒（ExoELISA-ULTRA CD63）测定外泌体浓度,比较ⅢA型前列腺炎患者及正常人之间的差异。3、用PKH-26荧光染料标记前列腺液来源的外泌体,外泌体与前列腺基质细胞（WPMY-1）共培养12小时,共聚焦荧光显微镜观察外泌体是否被细胞摄取。4、前列腺液来源的外泌体与WPMY-1细胞共培养48小时,Elisa检测上清中IL-1β、IL-8、TNF-a等炎症因子的水平。结果:1、超速离心从前列腺液及前列腺按摩后尿液中分离出囊泡状物质,TEM、WB及激光粒度仪结果表明,分离出的囊泡为外泌体。2、外泌体蛋白含量及外泌体数量测定显示,ⅢA型前列腺炎患者前列腺液和前列腺按摩后尿液中提取的外泌体,外泌体浓度及外泌体蛋白浓度均高于正常人。3、前列腺液来源的外泌体与WPMY-1共培养12小时,共聚焦荧光显微镜观察见外泌体被细胞摄取。4、Elisa检测显示,ⅢA型前列腺炎患者前列腺液来源的外泌体与WPMY-1细胞共培养48小时后,细胞上清中IL-8水平明显升高,而IL-1β、TNF-a未见明显变化。结论:ⅢA型前列腺炎患者前列腺液和前列腺按摩后尿液中的外泌体数量较正常人增多。ⅢA型前列腺炎患者前列腺液来源的外泌体会刺激前列腺基质细胞（WPMY-1）分泌IL-8增加,具有促炎作用。外泌体在ⅢA型前列腺炎中发挥着作用,具体机制还有待于进一步研究。