甘蓝型油菜(Brassica napus L.)是我国重要的油料经济作物,是我国食用植物油的主要来源之一。然而,甘蓝型油菜常受到多种病害的侵害,其中最为常见的有菌核病、病毒病、霜霉病、白锈病以及细菌性黑斑病、软腐病、黑斑病等。植物病害每年都能导致全球的农作物产量减产12%。油菜霜霉病是甘蓝型油菜全生育期中都能发生的一种病害,对油菜的产油量可造成较大的影响。在一定的地区,霜霉病是一种较为严重的油菜病害。拟南芥广谱抗病基因RPW8对白粉病、霜霉病、病毒病等具有良好的抗病性。RPW8基因位点包含两个连锁的抗病基因RPW8.1和RPW8.2。RPW8.1和RPW8.2两个基因在拟南芥中对霜霉病都能表现出抗性。拟南芥在植物分类上属十字花科,和甘蓝型油菜具有共同的祖先,亲缘关系较近。因此,本研究利用floral-dip法将含有RPW8.1基因的质粒载体导入到甘蓝型油菜中,获得了一批转基因株系,并对转基因株系进行接菌处理,然后再从表型、转录水平和细胞水平上对RPW8.1基因做进一步讨论。本研究获得以下几个方面的重要结果：1、利用floral-dip法将拟南芥广谱抗病基因RPW8.1导入了甘蓝型油菜,成功获得了转基因植株。经过对转基因植株进行双引物PCR检测分析,外源抗病基因RPW8.1已成功导入到甘蓝型油菜的基因组中。2、按照转化悬浮液的最佳比例：Ms培养基+蔗糖(15%mg/L)+6BA (0.01mg/ml) +silwet-77 (0.05%)中加入含有质粒载体的农杆菌菌体,在上午10点左右进行花序浸染效果最佳,转化率最高的是材料MY15-1-1,转化率非常接近2‰,明显高于其他处理次数和其他处理材料。从不同处理材料间处理次数相同时,各个材料的转化率都不相同,表明floral-dip法对不同的材料的转化率是不相同的,没有稳定的转化比例；另外,同一材料中不同处理次数的结果也表明浸染三次花序的效果明显高于两次和一次浸染,多次浸染能够明显提高材料的转化比例。3、对转基因株系进行霜霉病接菌后的表型观察表明,一些转基因株系能够对油菜霜霉病产生抗性,但是抗病程度不一,有些高抗,有些低抗；其他的转基因株系对油菜霜霉病没有产生抗性,同野生型油菜同样易感病。分析产生上述现象可能的原因是：外源基因插入了不同的基因位点,从而导致外源基因转录水平的明显不同,甚至外源基因沉默,没有进行表达。4、表现抗病的转基因植株有较高的RPW8.1表达水平。转基因植株总RNA半定量RT-PCR检测分析表明,RPW8.1基因能够转录翻译为蛋白质进行表达,使转基因株系产生抗性。5、通过观察野生型和转基因油菜植株叶片在接菌一周后的细胞学比较,在显微镜下发现RPW8.1基因对霜霉菌在油菜组织细胞中的生长产生了明显的抑制作用,RPW8.1基因通过抑制霜霉菌吸器的生长,切断了霜霉菌的营养和水分来源,最终导致霜霉菌的死亡,从而使转基因株系表现出对霜霉病的抗性。6、对转基因株系T2代遗传分离情况分析表明：自交后代的分离比例符合3：1,表明RPW8.1基因导入甘蓝型油菜的拷贝数是单拷贝的。