围产期奶牛脂肪肝发病风险评估及敏感性血清诊断指标筛选研究

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本试验通过两个部分,首先探究围产期脂肪肝相关血液指标变化,并确定疑似脂肪肝发病率,然后通过检测脂肪肝敏感血清指标来确定一种可能的脂肪肝生物标记物。第一部分:分别在预产期前28天、21天、14天、7天和产后2天、9天、16天和23天早饲前采集血清样测定NEFA、Glu和AST。发现NEFA在分娩后第2天到达最高水平,并在分娩后一直处于较高水平;Glu在分娩前处于较高水平,从分娩前第7天呈下降趋势,分娩后处于较低水平;AST分娩前处于较低水平,分娩前7天呈上升趋势,至分娩后第9天到达最大值。疑似脂肪肝发病率在分娩后第16天到达最大值(66.48%),而3胎及以上奶牛疑似脂肪肝发病率在分娩后各个时期都高于3胎以下奶牛组。第二部分:采集产后三个月以内的奶牛肝脏和血清。根据肝脏甘油三酯占肝脏湿重的比例将奶牛分为正常组和脂肪肝组。通过ELISA方法测定血清中磷脂酶A2、成纤维细胞生长因子-21、血红蛋白α、血红蛋白β、1,25-二羟基维生素D3含量,分析差异。结果发现成纤维细胞生长因子-21和血红蛋白β在两组之间均出现明显差异P值分别为0.0269和0.0312。我们推断这两种蛋白或许可以作为奶牛脂肪肝的血清生物标记物。将成纤维细胞生长因子-21和血红蛋白β平均值上下调整,根据误诊率和漏诊率确定脂肪肝诊断标准分别为1091.91ng/L和3.03ng/L。肝脏甘油三酯与血清中成纤维细胞生长-21有显著的正相关,但是相关系数仅为0.4939。分别拟合了成纤维细胞生长因子-21、血红蛋白β、脂蛋白相关磷脂酶A2三种指标与肝脏甘油三酯的回归方程,成纤维细胞生长因子-21、脂蛋白相关磷脂酶A2两种指标与肝脏甘油三酯的回归方程,单纯成纤维细胞生长因子-21与肝脏甘油三酯的回归方程三种回归方程,但是R2均较低,分别为0.3328,0.3229和0.2823。
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