【摘 要】
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目的:探讨微小RNA-31(microRNA-31,miR-31)对粘附分子CD44启动子的转录是否有调控作用。方法:1.培养人支气管上皮细胞,将细胞分为miR-31组和阴性对照(dscontrol)组,运用瞬时
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目的:探讨微小RNA-31(microRNA-31,miR-31)对粘附分子CD44启动子的转录是否有调控作用。方法:1.培养人支气管上皮细胞,将细胞分为miR-31组和阴性对照(dscontrol)组,运用瞬时转染方法将miR-31组细胞转染miR-31模拟物(miR-31 mimics),以使miR-31呈高表达,dscontrol组细胞转染阴性对照物(dscontrols),转染48h后提取总RNA,运用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-31组和dscontrol组基因CD44信使RNA(mRNA)的表达。2.培养人支气管上皮细胞,同样将细胞分为miR-31组和dscontrol组,分别瞬时转染miR-31 mimics和dscontrols,培养48小时后,运用染色质免疫共沉淀实验(ChIP)共沉淀两组中CD44启动子区与转录因子RNA聚合酶Ⅱ结合的DNA片段,运用qRT-PCR检测CD44启动子区与RNA聚合酶Ⅱ结合的DNA量,经过校正后,得出CD44启动子区RNA聚合酶Ⅱ的富集倍数。结果:1.MiR-31组CD44 mRNA的相对表达量明显高于dscontrol组,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.MiR-31组的RNA聚合酶Ⅱ的富集倍数明显低于dscontrol组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MiR-31能上调靶基因CD44 mRNA水平的表达,且对CD44启动子区转录有调控作用,但不能通过激活RNA聚合酶Ⅱ上调启动子转录水平。
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