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研究背景及目的: 长期、无节制的饮酒精是造成人类肝脏损害的重要原因,过量的酒精可破坏肝细胞,产生的不同发展进程的病变——酒精性脂肪肝,酒精性肝炎(alcoholic hepatitis)到酒精性肝纤维化(alcoholic hepatic fibrosis)和酒精性肝硬变(alcoholic Hepatic cirrhosis)。虽然新药物药理机制不断得以阐明,治疗手段不断有新的进展,但至今酒精性肝病(ALD)尚无特效疗法。茶多酚(teapolyphenol,TP)是从天然植物茶叶中分离提纯出来的多酚类化合物的复合体。世界上各国家利地区,尤其如中国、日本等国家都对这种多酚类化合物的复合体开展了大量的药理学研究和试验。研究发现茶多酚有多种药理作胣,尤其在保肝护肝、抗氧化利免疫调节等方面效果显著。本动物实验研究就是要根据茶多酚的药理作用特性,观察其对酒精性肝损伤动物模型的保护作用,以探讨茶多酚预防和治疗酒精性肝病中的作用机理。 材料与方法 S-D大鼠120只(体重180-210克),于浙江大学医学院动物中心以清洁Ⅱ级标准饲养:随机分成五组(A、B、C、D和E组),每组大鼠雌雄各半。每头大鼠分别按7g/kg剂量,以56°北京产红星二锅头酒,每日晨一次灌胃给予;除A组单纯酒精灌胃外,B、C、D组酒精灌胃同时,每天分别以0.05、0.125、0.25g/kg的剂量灌胃给予茶多酚;E组为正常对照组,每日仅给予以同样剂量饮用水灌胃一次。实验中常规观察各组大鼠的 浙江大学硕士毕业论文 精神状态、活动情况,毛发光泽度,进食以及排泄情况。 分别于 4周末、12周末和 24周末分批处死大鼠,采大鼠股静脉血,处死的大鼠 留取肝脏标本以10%福尔马林同定。对血清标本分别进行:a.肝功能:血清测定丙氨酸 氨基转移酶和大冬氨酸氨基转移酶。b.抗氧化物质测定:采用试剂盒分别测定血液标本 的丙二醛、谷脱甘肽、超氧化物歧化酶。。以锚实验法测定血清标本内毒素水平。对肝 脏组织标本进行led定、包埋、切片及常规HE染色,Masson三色染色,光镜下观察肝组 织损伤情况一一包括脂肪变性,炎症改变和胶原组织沉积等变化,并进行定量和”#定量 统计分析。 研究结果: 1.实验过程中共有87只人鼠存活(所有死亡人鼠均为酒精灌胃组,正常对照组均存 活)。本实验中,酒精灌胃组大鼠在初期灌食酒精后均有流涎,体态呆板,嗜睡, 精神萎靡,食欲减退,行动迟缓等醉酒现象,一般经4-5小时后可恢复。并表现为 毛发光泽度差,体重增长缓慢,多数大鼠出现排稀大便。而药物组大鼠在灌食酒精 后醒酒的时间较前者短,食欲较前为佳实验50天以后上述表现减轻。正常组大鼠 则精神状态好,食欲佳,无嗜睡等现象,人便止常。 2.单纯酒精绢4、12和24周谷草转氨酶(AST)水平较上止常对照组明显增高:4周 低剂茶多酚织AST水平明显高工山常对照织,而中、高剂茶多酚组AST水平明显低 丁单纯酒粕织。12周低、中、高剂茶多酚组吁T水平明显低丁单纯酒精组。24周 低、中剂茶多酚组 AST水平明显高丁,而高剂茶多酚组 AST水平明显低于单纯酒精 组及低、中剂茶多酚组,与止常对照组则无明显差别。入鼠血清中谷丙转氨酶(ALT) 水平差异主要表现在第二阶段,24周高剂茶多酚组ALT水平明显低于低、中剂茶多 酚组和单纯酒粕绢,而低、中利茶多酚组AST水平明显高丁止常对照组。而4、120 周组各组间ALT水平变化则无统计学意义。 3.第二阶段12周单纯酒精组人鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)水平明显低于正常对照 组,丙。醛(MDA)水平在各组间变化则无明显差异,还原谷脱甘肽(GSH)水平低 于正常对照组,但无统计学差异;低、中、高剂茶多酚组SOD水平和高于单纯酒精 3 折江大学颀士毕业论文 组,以中剂茶多酚织为著,低、中、高剂茶多酚组GSH水平高于I’(纯酒精组,以低、 中剂茶多酚纽为著。第二阶段 24周单纯酒精组大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)水 平明显低于止常对照组,丙二醛(MDA)水平明显高于正常对照组,还原谷脸甘肽 (GSH)水平低下正常对照组,但无统计学差异:低、中、高剂茶多酚组SOD水平 均明显高T单纯酒精组,其中高剂茶多酚组SOD水平高于正常对照组,低、中、高0 剂茶多酚组丙二醛GSH水平明显低于单纯酒精组,GSH水平明显高于单纯酒精组.