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背景:类风湿关节炎是一种慢性自身免疫性疾病,致残率高,常常影响患者生活质量,严重者甚至危及患者寿命。其主要特点是滑膜炎反复发作,导致软骨、骨质及关节周围结构的侵蚀和破坏,但是类风湿关节炎的病因仍不明确。IL-17是CD4+T细胞亚群TH17分泌的细胞因子,能调节前炎性因子的产生及分泌,在白细胞的迁移、破骨细胞的活化和骨质的吸收等方面发挥重要作用。
研究目的:探讨白细胞介素-17(IL-17)对人滑膜细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因表达的调节作用及意义,更好地理解类风湿关节炎的发生机制。
研究方法:收集急性外伤性半月板损伤患者膝关节滑膜组织(8例),采用组织块培养法进行原代滑膜细胞培养,取第3至5代细胞用流式细胞仪鉴定细胞,然后用不同剂量重组人IL-17(分别为:0、1、10、20 ng/ml)刺激传代培养的人滑膜细胞24 h,用RT-PCR检测各组MMP-9基因的表达;另外用剂量为10 ng/ml重组人IL-17分别作用于传代培养的人滑膜细胞0,12,24,36h,用RT-PCR检测在不同作用时间内MMP-9基因的表达。
结果:组织块培养法获得的人滑膜细胞符合人关节滑膜成纤维细胞的特点,这些细胞均一的表达CD90、而不表达CD14,并且表达一定量的MMP-9。以1、10、20 ng/ml重组人IL-17作用滑膜细胞24 h,MMP-9mRNA表达均较对照组(0 ng/ml组)高,组间差异有统计学意义(p<0.05),且存在明显的正相剂量依赖关系;以10 ng/ml的重组人IL-17作用滑膜细胞12、24、36 h,与对照组(0 h组)比较,12h、24h及36 h组表达增加差异有统计学意义(p<0.05);12 h后MMP-9 mRNA表达增加,24 h到达高峰,36 h后明显下降。
结论:
1.组织块培养法可以有效分离人关节滑膜细胞,能获得高纯度的人成纤维样滑膜细胞。
2.IL-17可以按照剂量依赖方式正向调节人的滑膜细胞MMP-9基因表达,在关节局部炎症进展中可能发挥重要作用。