【摘 要】
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目的:探讨补肾化瘀生新方对骨髓间充质干细胞β-半乳糖苷酶活性的调控作用及其延缓细胞衰老的机制。 方法:40只SPF级SD大鼠随机分为补肾化瘀生新组和对照组,补肾化瘀生新组为
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目的:探讨补肾化瘀生新方对骨髓间充质干细胞β-半乳糖苷酶活性的调控作用及其延缓细胞衰老的机制。 方法:40只SPF级SD大鼠随机分为补肾化瘀生新组和对照组,补肾化瘀生新组为补肾化瘀生新方灌胃,对照组生理盐水灌胃,连续灌胃7天,早晚各一次。第7天首次灌胃2h后腹主动脉取血制备含药血清;100只SD新生乳鼠进行BMSCs的提取、培养及分离纯化,用4g/L D-gal诱导建立BMSCs衰老模型。将自然衰老及衰老模型组随机分为补肾化瘀生新组和对照组,将制备好的含药血清直接用于细胞培养。光镜观察每组各代 BMSCs的形态变化;MTT法检测各组不同浓度血清BMSCs细胞活性的变化;比色法检测自然衰老各组及衰老模型各组β-半乳糖苷酶活性变化。 结果:光镜下见正常培养的BMSCs形态均一,呈长梭形、三角形,并呈漩涡样生长,衰老模型组 BMSCs多呈扁三角形、椭圆形,且生长缓慢;根据 MTT细胞增殖结果可知第1天和第2天时细胞生长较慢,处于增殖潜伏期,在第3天时开始迅速分裂增殖;补肾化瘀生新组的细胞存活率高于对照组、DMEM对照组;10%浓度的含药血清为细胞生长所需的适宜浓度;正常未诱导组及衰老模型组各组细胞的β-gal的活性均随着分裂代次的增加,而逐渐增高,且补肾化瘀生新组低于对照组,有统计学意义(P<0.05)。 结论:在BMSCs自然衰老状态,以及诱导其衰老的情况下,补肾化瘀生新方可降低BMSCs中β-半乳糖苷酶的活性,有延缓BMSCs衰老的作用。
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