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[目的]胞壁酰二肽(MDP)是细菌中普遍存在的具有佐剂效应的肽类物质。近年来,MDP及其衍生物作为佐剂分子被广泛研究。因此,探讨MDP在HIV DNA疫苗中的免疫佐剂效应,可为HIV DNA疫苗的研发提供科学依据。[方法]将18只小鼠随机分为三组,分别为:空白组、HIV DNA疫苗组和“HIV DNA疫苗+MDP”组,每组6只。通过质粒提取获得HIVGag DNA疫苗和HIV Env DNA疫苗。使用MDP作为佐剂,与上述HIV DNA疫苗联合免疫小鼠,一共免疫三次,每次间隔时间为两周。免疫完成两周后,提取小鼠免疫细胞,进行流式细胞术检测,主要检测指标有:CD4+T细胞和CD8+T细胞的IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ分泌情况和树突状细胞表面CD80、CD86的表达变化;同时,分离小鼠血清,将血清稀释100倍、1000倍、10000倍,通过ELISA检测小鼠血清中Gag特异性IgG和Env特异性IgG滴度。[结果]流式细胞术结果显示:①三组小鼠的Gag特异性CD4+T细胞和CD8+T细胞的IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ分泌均无显著差异(P>0.05);②Env特异性CD4+T细胞IL-2的分泌在“HIV DNA疫苗+MDP”组和空白组差异具有统计学意义(P<0.05),其他细胞因子的分泌在三组小鼠的Env特异性CD4+T细胞中均无显著差异(P>0.05);③三组小鼠的Env特异性CD8+T细胞的IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ分泌均无显著差异(P>0.05);④三组小鼠树突状细胞的CD80、CD86表达差异无明显统计学意义(P>0.05)。ELISA结果显示:①在小鼠血清稀释100倍、1000倍、10000倍时,“HIV DNA疫苗+MDP”组的Gag特异性IgG滴度与HIVDNA疫苗组相比差异均有统计学意义(P<0.05);②在小鼠血清稀释100倍、1000倍、10000倍时,HIV DNA疫苗组的Gag特异性IgG滴度与空白组相比差异均无显著统计学差异(P>0.05);③“HIVDNA疫苗+MDP”组的Env特异性IgG滴度在小鼠血清稀释1000倍、10000倍时,与HIV DNA疫苗组相比差异具有统计学意义(P<0.05),在小鼠血清稀释100倍时,无明显统计学差异(P>0.05);④HIV DNA疫苗组的Env特异性IgG滴度在小鼠血清稀释100倍时,与空白组相比差异具有统计学意义(P<0.05);在小鼠血清稀释1000倍、10000倍时,与空白组相比差异均无显著统计学差异(P>0.05)。[结论](1)在小鼠模型中,MDP可以有效增强HIV DNA疫苗诱发的特异性IgG反应(Gag和Env)。(2)在小鼠模型中,MDP对HIV DNA疫苗诱发的细胞免疫反应无显著增强效应。[目的]探讨原发性胆汁性胆管炎(PBC)的病理诊断方法和指标。[方法]收集2015年1月至2019年3月昆明医科大学病理学教研室肝穿病例68例,包括PBC 55例和原发性胆汁性胆管炎-自身免疫性肝炎重叠综合征(PBC-AIH OS)患者13例。将55例PBC根据患者血清抗线粒体抗体二型(AMA-M2)滴度分为AMA-M2阳性PBC组28例、AMA-M2阴性PBC组27例;根据PBC分期分为PBC Ⅰ期15例、PBC Ⅱ期14例、PBC Ⅲ期9例和PBC Ⅳ期7例。收集患者的性别、年龄、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)等临床资料评估重要的实验室指标的变化情况,采用免疫组化法检测AMA、Kelch样蛋白12(KLHL12)和己糖激酶1(HK1)在PBC和PBC-AIH OS中的表达情况,分析AMA、KLHL12和HK1在PBC中的临床诊断价值,以期为PBC的临床诊断提供新的自身抗体标志物。[结果](1)AMA-M2阳性PBC、AMA-M2阴性PBC和PBC-AIH OS三组患者的性别、年龄、ALT、AST、ALP等临床指标差异无统计学意义。(2)免疫组化结果显示:AMA主要表达于胆管上皮细胞及肝细胞的胞浆中;KLHL12主要表达于肝细胞的胞浆中;HK1主要表达于Kupffer细胞、胆管上皮细胞及炎细胞的细胞质和细胞膜中。AMA-M2阳性PBC组、AMA-M2阴性PBC组和PBC-AIH OS组三组两两相比,AMA表达阳性率和表达强度差异在AMA-M2阳性PBC组和AMA-M2阴性PBC组具有统计学意义(P值分别为0.003、0.012),其余两两相比无显著统计学差异(P>0.05);KLHL12表达阳性率和表达强度差异在AMA-M2阳性PBC组和AMA-M2阴性PBC组具有统计学意义(P值分别为0.003、0.012),其余两两相比无显著统计学差异(P>0.05);HK1表达阳性率差异在AMA-M2阳性PBC组和AMA-M2阴性PBC组具有统计学意义(P=0.042);HK1表达强度差异在AMA-M2阳性PBC组和PBC-AIH OS组具有统计学意义(P=0.026),其余两两相比无显著统计学差异(P>0.05)。AMA、KLHL12和HK1在PBC不同分期的表达强度和表达阳性率差异均无明显统计学意义(P>0.05)。[结论](1)AMA、KLHL12 和 HK1 在 AMA-M2 阳性 PBC、AMA-M2 阴性 PBC和PBC-AIHOS三组肝穿组织的表达部位无差异;(2)AMA、KLHL12和HK1的表达阳性率和阳性强度与PBC分期均无明显相关性;(3)在本实验检测的三种指标中,KLHL12表达阳性率在AMA-M2阳性PBC组和AMA-M2阴性PBC组均最高,其检测可能有助于PBC的临床诊断;(4)KLHL12和HK1在AMA-M2阴性PBC中具有较高的阳性率,可能有助于AMA-M2阴性PBC患者的诊断;(5)本实验结果表明,KLHL12和HK1可能不能作为PBC和PBC-AIH OS的鉴别指标。