【摘 要】
：
红花草莓是由远缘杂交（Fragaria×Potentilla）得到的一种花色鲜艳、花期长、果实可食的新型观赏花卉,与以往开白花的栽培草莓不同的是,其花色多样,有红色,深粉色,粉色等。花色是红花草莓重要的观赏性状之一,花青苷是花瓣的主要成色物质。MYB转录因子在不同植物花青苷代谢过程中具有重要作用,那MYB转录因子是如何参与红花草莓花瓣花青苷合成调控的。本研究利用红花草莓品种‘四季红’,及其他不同花
论文部分内容阅读
红花草莓是由远缘杂交（Fragaria×Potentilla）得到的一种花色鲜艳、花期长、果实可食的新型观赏花卉,与以往开白花的栽培草莓不同的是,其花色多样,有红色,深粉色,粉色等。花色是红花草莓重要的观赏性状之一,花青苷是花瓣的主要成色物质。MYB转录因子在不同植物花青苷代谢过程中具有重要作用,那MYB转录因子是如何参与红花草莓花瓣花青苷合成调控的。本研究利用红花草莓品种‘四季红’,及其他不同花色杂交后代作为主要的研究材料,基于八倍体草莓MYB基因家族分析及红花草莓转录组测序,筛选出5个MYB基因与红花草莓花瓣花青苷合成有关,并对其中的2个MYB基因进行克隆与功能验证,由于该基因的表达具有明显的时空表达差异特性,后期选取花瓣中表达量高的MYB基因进行体外蛋白表达,探究其转录因子的调控结合位点,试验主要结果如下:1.基于红花草莓有参转录组数据,对其中蕾期（L）、转色期（Z）、大蕾期（D）三个时期表达差异显著的MYB基因与拟南芥中确定的MYB基因利用MEGA构建系统进化树进行初步筛选。进一步利用Z-score标准化TPM值绘制热图进行系统聚类分析以及实时荧光定量qRT-PCR进行时空表达模式分析筛选出调控红花草莓花青苷合成的相关FpMYB基因,并根据已知物种功能将其分为正向调控因子与负向调控因子二类。2.利用PCR技术进行目的基因片段扩增克隆出2个FpMYB基因,命名为FpMYB90与FpMYB308。由初步的生物信息学分析可以看出:它们有典型的MYB结构域在N端同时与其他一些物种中已知的MYB转录因子结构域有很高的同源性,初步确定二者为R2R3型MYB转录因子,亚细胞定位预测显示主要作用在细胞核。3.构建FpMYB90与FpMYB308的亚细胞定位载体与过表达载体。对其功能进行初步的鉴定,构建具有绿色荧光的FpMYB90-eGFP与FpMYB308-eGFP融合表达载体,瞬时侵染烟草叶片后进行观察确定其主要定位于细胞核,与软件预测结果一致属于细胞核基因。构建完成pRI-101-AN-FpMYB90与pRI-101-AN-FpMYB308融合过表达载体,侵染烟草,但表型变化不明显,利用RT-PCR确定侵染完成。4.对FpMYB90进行DNA亲和纯化测序及下游靶基因的鉴定,主要通过体外蛋白表达,在体外开展蛋白结合的DNA片段研究,进行转录因子结合位点研究,初步推测互作可能的基因为C2H2型锌指蛋白—PRDM1和AT1G69570;并利用荧光定量PCR对花青苷合成途径进行靶基因预测分析,发现下游F3H、DFR、ANS、UFGT基因可能受FpMYB90调控。
其他文献
番茄（Solanum lycopersicum L.）是设施栽培的主要蔬菜品种之一。秋冬茬番茄果实成熟过程中常受到低温伤害,严重影响番茄的产量和品质。随着生活水平的提高,人们开始更多的关注果实风味。番茄的风味主要受糖、酸和多种挥发性物质的影响,并且目前研究主要集中在采后低温贮藏对番茄果实品质的影响,包括糖、酸代谢以及挥发性物质变化,但在设施栽培中低温对果实成熟期风味品质的影响却鲜有报道。本研究以番
番茄（Solanum lycopersicum L.）是种植广泛的栽培作物,在经济上也起着十分重要的作用,它对一系列非生物胁迫,特别是极端温度十分敏感。低温严重影响植物的生长发育,其中光合作用是非常重要的过程。而脱落酸（ABA）是一种常用的植物激素,它调控从气孔开放到蛋白质储存的各种生理过程,并适应多种胁迫。在此,本研究以ABA缺失突变体sit及其野生型RR为试材,进行外源ABA预处理及常温（25
薄皮甜瓜（Cucumis melo var.makuwa Makino）在我国栽培历史悠久,以其甘甜爽口的品质深受消费者青睐。糖含量是薄皮甜瓜成熟时果实品质的决定因素。研究表明果实成熟过程中淀粉逐渐降解,导致可溶性糖积累,但两者之间的具体关系尚需进一步明确。因此,本试验选用蔗糖含有差异的薄皮甜瓜品种为试材,即高糖型品种‘YMR’和‘HDB’,低糖型品种‘XSM’和‘HPM’。测定果实发育过程中淀粉
肌醇半乳糖苷合成酶（galactinol synthase,Gol S）在棉子糖家族寡糖（raffinose family oligosaccharides,RFOs）的生物合成过程中起到关键性限速作用。RFOs是植物中重要的可溶性碳水化合物,包括三糖棉子糖、四糖水苏糖和五糖毛蕊花糖,具有储备碳水化合物、稳定膜结构、抵御逆境胁迫、参与渗透调节的功能。Gol S通过影响RFOs的含量参与调节植物生长
大白菜花药发育受复杂基因网络的精密调控,但是目前其发育调控机制尚不清楚。在本研究中,使用大白菜DH系‘FT’为试材,利用全转录组分析技术,对花药和Mix（四片真叶的营养体）分别进行了全转录组测序,鉴定了一系列与大白菜花药发育相关的环状RNA（circRNA）、长链非编码RNA（lncRNA）、mRNA和microRNA（miRNA）,并建立竞争性内源RNA（ceRNA）调控网络。主要研究结果如下:
大白菜属于种子春化型蔬菜作物,适时抽薹对其育种和生产工作都至关重要,但目前大白菜的种子春化机理尚不明晰。本研究以‘FT’（大白菜双单倍体）萌发的种子为试材,一组进行25d,4℃春化处理（“Ver”）,另外一组常温25℃暗培养（“Nor”）至种芽长度同Ver处理等长,继而利用第二代测序技术对以上样品全转录组进行了对比分析,发掘与大白菜种子春化相关的m RNA、lnc RNA、circ RNA和mi
射干（Iris domestica）和野鸢尾（Iris dichotoma）都是鸢尾科（Iridaceae）鸢尾属（Iris）中的多年生草本植物。两者花期均在6-8月,单花花期为一天,总体花量大、花期长。射干的花在早上6:30左右开放,野鸢尾的花在下午15:00左右开放,花期可遇,且能够获得可育的杂种后代,是研究一天内花朵开闭时间很好的试材。本试验利用射干开花早的特性,选取野鸢尾和射干为亲本进行杂
设施蔬菜在北方冬春季栽培中极易受到夜间低温的伤害,导致自身受到光合损伤,低夜温对光合作用的影响是多方面的,如引起光合电子传递变慢、光抑制和叶绿体形态的改变等。光合作用主要发生在叶绿体上,叶绿体是植物体内重要的钙库,外施钙源会使番茄叶绿体形态规则整齐,缓解低夜温对叶绿体的伤害,提高光合作用能力,但是具体的缓解机制尚不清楚。在对定位在叶绿体上的细胞外钙受体（calcium-sensing recept
随着我国设施蔬菜产业的集约化发展,土壤连作障碍也日益严重,已影响了我国设施产业的进一步发展。黄瓜是我国设施栽培的主要蔬菜作物之一,同时目前有关设施蔬菜长期连作对土壤及植株中量和微量元素的影响还不明确。为此,本试验以‘津优30’黄瓜为试验材料,研究了日光温室黄瓜2～26茬连作对土壤及植株中量和微量元素的影响,明确土壤中量和微量元素变化特点,以及黄瓜植株对中量和微量的吸收与分配特征,以期为日光温室蔬菜
红花草莓（Red-flowered strawberry）为属间杂种,其红花性状是由开红花的沼委陵菜（Potentilla palustris）与开白花的栽培草莓（Fragaria×ananassa）通过远缘杂交的方式获得的。由于红花草莓花瓣中谷胱甘肽转移酶（Glutathione S-Transferase,GST）在花青苷积累方面的作用尚不明确,本研究以课题组自育的红花草莓品种红色的‘四季红’