【摘 要】
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根据已发表的肝片吸虫组织蛋白酶L1(FheCL1)的cDNA序列,设计并合成了能与特定载体末端互补的一对引物,上下引物之间跨幅1042bp.从广西牛肝脏胆管中取出活的肝片吸虫,冷冻条件下
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根据已发表的肝片吸虫组织蛋白酶L1(FheCL1)的cDNA序列,设计并合成了能与特定载体末端互补的一对引物,上下引物之间跨幅1042bp.从广西牛肝脏胆管中取出活的肝片吸虫,冷冻条件下快速磨成匀浆,抽提出总RNA,经反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出FheCL1的特异性片段.通过DNA重组技术,将RT-PCR产物经Hind Ⅲ/BamHⅠ双酶切的片段克隆到载体质粒pBluescriptⅡSK+/-中.用得到的重组子为模板,进行PCR扩增,再将PCR产物经Hind Ⅲ/BamHⅠ双酶切的片段克隆到载体质粒pcDNA3.1-E中.得到重组质粒FheCL1-pcDNA3,对质粒中的外源性片段进行双向序列测定.
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