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目的:RACK1是一种游离于细胞中的支架蛋白,参与细胞中多种生化反应,影响细胞的生物学功能。课题组前期相关研究证实,在宫颈癌组织中RACK1蛋白的表达升高,且在正常组织、宫颈上皮内瘤变I、II、III级及宫颈癌组织中呈正相关,故本实验拟在通过体外细胞实验初步研究体外RACK1的表达上调后对于SiHa细胞增殖、凋亡能力的影响,为进一步探讨RACK1在宫颈癌疾病发生发展及其预后中的相关作用机制奠定一定的基础。方法:选取上海细胞库提供的人SiHa细胞株进行传代培养,通过脂质体法将RACK1过表达质粒及空白质粒分组进行转染,并利用RT-qPCR测定各组细胞转染后RACK1蛋白的mRNA的相对表达量,利用Western-Blot法测定各组细胞中RACK1蛋白的相对表达量,获得稳定高表达RACK1的SiHa细胞株,然后采用CCK-8法,利用酶标仪连续测量转染后各组细胞的吸光度,以此来比较各组细胞增殖情况;最后采用流式细胞仪检测细胞的凋亡变化情况。利用SPSS16.0软件进行统计资料的分析处理。结果:1.RACK1过表达质粒组测得的mRNA的相对表达量为1.25±0.59,分别与空白质粒转染组(0.71±0.12)、未转染组(0.66±0.07)相比,含量明显升高(P<0.05);2.过表达质粒组RACK1蛋白的相对含量(0.94±0.08)高于其他2组,差异具有统计学意义(P<0.05);但空白质粒组(0.74±0.07)与未处理组(0.72±0.09)的RACK1的相对含量之间无显著性差异;3.RACK1的过表达可以促进宫颈癌SiHa细胞的生长增殖,通过CCK-8法连续测量各组细胞吸光度,并对其比较,可见过表达质粒组细胞生长增殖速度明显高于其他两组(P<0.05);4.RACK1的过表达可以抑制宫颈癌SiHa细胞的凋亡。通过流式细胞仪对转染后各组细胞凋亡率测定。过表达质粒组细胞凋亡率(5.70±1.47)低于空白质粒转染组(15.73±1.28)及未转染组(17.37±3.01)(P<0.05)。结论:1.在体外成功构建RACK1过表达的宫颈癌Si Ha细胞株;2.RACK1蛋白的过表达在体外可促进宫颈癌Si Ha细胞的增殖,抑制细胞凋亡,提示其对宫颈癌疾病发生发展有一定的促进作用。