研究背景:与活体肝移植相比,脑死亡供体肝移植具有较差的移植效果,较短的移植物存活期。脑死亡被认为是影响脑死亡肝移植术后效果的一个重要因素。除了血流动力学之外,脑死亡对器官和移植后结局的恶化作用的机制主要与全身炎症反应有关。在脑死亡期间和之后释放的促炎性细胞因子通过引发全身炎症反应导致潜在供体器官的组织学损伤和功能障碍。缺血/再灌注损伤是造成脑死亡肝移植术后移植物初期功能不全和原发性移植物无功能的另外一个因素。而炎症反应也参与肝移植缺血再灌注损伤。因此,抑制炎症反应不仅能缓减脑死亡诱发供体器官损伤,而且能够改善移植后的缺血再灌注损伤。依那西普是一种由融合于人IgG1 Fc部分的TNF-R2胞外域二聚体组成的重组蛋白。它是TNF-α特异性拮抗剂之一,通过中和TNF-α减轻炎症反应,目前已用于改善类风湿性关节炎和强直性脊柱炎。最近研究表明,依那西普治疗也能减轻脑损伤以及急性肝损伤。目的:1.研究依那西普在大鼠脑死亡相关的肝损伤中的保护作用;2.通过建立脑死亡供体肝移植大鼠模型,研究依那西普对脑死亡肝移植缺血再灌注损伤中的作用。方法:1.建立大鼠模型,评估脑死亡引起的肝损伤和依那西普的潜在保护作用。大鼠随机为四组（n=8每组）:假手术+生理盐水干预组,假手术+依那西普干预组,脑死亡组+生理盐水干预组和脑死亡+依那西普组。模型建立后观察6h后处死大鼠获取血液和肝组织标本。通过肝功能测量和组织学检查评估肝损伤,血清和肝脏TNF-α水平分别通过ELISA和原位免疫荧光（IF-IC）测量。通过半定量实时聚合酶链式反应检测与炎症有关的基因的表达水平。此外,通过IF-IC分析半胱天冬酶-3和通过原位末端检测技术（TUNEL）法来检查肝细胞凋亡。2.SD大鼠随机分为5各组（n=6每组）:假手术组,非脑死亡大鼠肝移植组,非脑死亡大鼠肝移植+依那西普受体干预组,脑死亡大鼠肝移植组和脑死亡大鼠肝移植+受体依那西普干预组。除假手术组外将来自不同的供肝移植到同种SD大鼠受体中,12h取血清和肝组织标本。受体大鼠“下肝”时静脉注射依那西普或生理盐水。通过肝功能测量和组织学检查评估肝损伤,血清和肝脏TNF-α水平分别通过ELISA和免疫组化测量。通过半定量实时聚合酶链式反应检测与炎症有关的基因的表达水平。通过IF-IC分析半胱天冬酶-3的表达。通过检测丙二醛和超氧化物歧化酶评估肝脏氧化应激情况。结果:1.依那西普治疗中和了肝脏和血浆中因BD诱导而升高的TNF-α水平,并使IL-1 β,VCAM-1和ICAM-1 mRNA表达的显著下调（与BD组相比P<0.01）。干预组大鼠肝组织中的活性半胱氨酸蛋白酶-3和细胞凋亡水平与单纯脑死亡大鼠相比较显著下降了,证明依那西普干预也肝组织中细胞凋亡情况显著改善。这些变化伴随着肝功能改善（与BD组相比P<0.05）和组织病理学改变。2.通过大鼠肝组织损伤,血清转氨酶,细胞浸润,炎性细胞因子水平,细胞凋亡和氧化应激标志物等指标结果证明,在大鼠模型中,供体脑死亡加重了移植后缺血/再灌注损伤。与未干预移植对照组相比,而依那西普治疗受体显著降低了来自脑死亡和非脑死亡供体的移植物的所有测量结果。结论:1.我们的研究结果表明,依那西普对BD诱导的大鼠肝损伤具有保护作用。因此,TNF-α的抑制是改善脑死亡供体肝脏移植结果的有希望的治疗策略。2.BD加重大鼠移植后肝脏缺血/再灌注损伤,并且在受体大鼠中依那西普治疗改善BD-加重的肝脏缺血/再灌注损伤。