目的:利用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC/Q-TOFMS)技术建立中药十八反中乌头、藜芦各自相反药对配伍禁忌的化学指纹图谱、毒性成分差异指纹图谱、相关质谱数据库及检索方法,明确各配伍禁忌致毒/增毒的化学实质及规律,从而探讨其产生毒性的可能机制,最终从化学变化的角度阐述中药十八反中“半蒌贝蔹芨攻乌”以及人参、玄参反藜芦的化学本质,为进一步探究中药十八反的相反配伍规律提供化学物质基础信息和实验支撑,为临床安全和有效运用乌头、藜芦十八反配伍药材提供科学依据,完善、丰富和发展中药配伍禁忌理论,为中医临床用药提供实验依据。方法:①乌头与半夏、瓜蒌、贝母、白蔹、白芨配伍禁忌的化学成分定性分析研究:建立基于UPLC/Q-TOFMS的“半蒌贝蔹芨攻乌”中各单药与乌头相互配伍前后的化学指纹图谱及毒性成分差异指纹图谱,通过主成分分析法(PCA)和正交偏最小二乘判别法(OPLS-DA)分析各相反药对在配伍合煎过程中的化学成分变化,找出差异变化显著的化学成分,明确各配伍禁忌相反药对在体外合煎过程中发生的化学成分变化,最终明确乌头与半夏、瓜蒌、贝母、白蔹、白芨配伍致毒/增毒的化学物质基础。②藜芦与人参、玄参配伍禁忌的化学成分定性分析研究:建立基于UPLC/Q-TOFMS的人参、玄参与藜芦相互配伍前后的化学指纹图谱及毒性成分差异指纹图谱,通过主成分分析法(PCA)和正交偏最小二乘判别法(OPLS-DA)分析各相反药对在配伍合煎过程中的化学成分变化,找出差异变化显著的化学成分,明确各配伍禁忌相反药对在体外合煎过程中发生的化学成分变化,最终明确藜芦与人参、玄参配伍致毒/增毒的化学物质基础。③中药配伍禁忌化学成分液质联用分析质谱库的建立:基于MassLynx液质工作站开发Exact Mass Search(EMS)软件,通过EMS的数据库功能建立应用于中药化学成分自动检索、快速定性的质谱数据库,并自动完成总离子流色谱图中各分子离子色谱峰的识别、质谱图提取及成分的鉴定,并应用于中药配伍禁忌相关研究的质谱库检索中,提高化学成分鉴定的效率。结果:1.乌头分别与半夏、瓜蒌、白芨合煎后乌头碱、中乌头碱、次乌头碱、10-OH-乌头碱、10-OH-中乌头碱、去氧乌头碱等DDAs含量均显著增加;乌头与白蔹合煎后次乌头碱、去氧乌头碱、10-OH-中乌头碱等DDAs含量显著增加;乌头与贝母(川贝母、浙贝母)合煎后次乌头碱含量增加,乌头与川贝配伍毒性相对较小,且药效成分没有明显变化,而乌头与浙贝配伍存在明显的增毒减效(增加毒性成分降低药效成分)作用;2.藜芦与人参配伍合煎后芥芬胺、伪芥芬胺、去氧芥芬胺、当归酰棋盘花胺、红芥芬胺、藜芦酰棋盘花胺、藜芦定碱含量显著增加;藜芦与玄参配伍合煎后藜芦新碱、藜芦嗪、藜芦胺碱、伪芥芬胺含量显著增加;3.基于MassLynx液质工作站,开发了质谱快速检索软件EMS,通过EMS建立了应用于中药配伍禁忌化学成分自动检索、快速定性的质谱数据库,显著提高了化学成分定性分析的效率和准确度。结论:1、“半蒌贝蔹芨攻乌”配伍致毒/增毒的原因主要是由于诸药与乌头配伍合煎后毒性成分乌头碱、中乌头碱、次乌头碱、10-羟基乌头碱、10-羟基中乌头碱以及去氧乌头碱等双酯型生物碱的溶出增加,且水解受到抑制所致。2、藜芦与人参、玄参配伍致毒/增毒的原因主要由于各单药与藜芦配伍合煎后芥藜芦碱类、棋盘花胺类、藜芦定碱等藜芦类甾体生物碱溶出增加,且人参与藜芦配伍后部分人参皂苷类药效成分的溶出受到影响。3、以中药十八反中的乌头、藜芦配伍禁忌为例,基于MassLynx液质工作站,开发了质谱快速检索软件EMS,通过EMS建立了应用于中药配伍禁忌化学成分自动检索、快速定性的质谱数据库,显著提高了化学成分定性分析的效率。