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目的：骨关节炎(osteoarthritis, OA)病因复杂,目前尚未明确,因此很难进行有效的治疗。目前对该病的治疗,国内外多采用综合措施。在多种治疗方法中,关节腔内注射是常用而且见效快的治疗方式,目前常用药物为糖皮质激素和玻璃酸钠,虽然能够在短期内改善症状,但是却不能阻止OA进展。关节镜下的统计表明50%的OA患者都存在局部滑膜增生和炎性改变,滑膜炎是由软骨基质降解产物引起的继发性反应,过度增生的滑膜会产生各种蛋白酶及炎性因子,加速疾病进展,滑膜炎在OA发生发展过程中发挥重要的作用,因此滑膜逐渐成为OA治疗的新靶点。本课题的目的是通过动物整体水平标本大体观察,电镜观察,检测血清和关节液中金属蛋白酶(MMP-3),一氧化氮(NO)的含量来评价5-氟脲嘧啶关节腔内注射治疗兔膝骨性关节炎的疗效,在细胞水平检测5-氟脲嘧啶单独作用对软骨细胞的增殖的影响以及5-氟脲嘧啶与白介素-1β共同作用时对软骨细胞NO生成的影响并探讨其机制,为临床OA的治疗提供新的用药思路。方法：动物实验：取20只新西兰兔随机分为4组,分别为：5-氟脲嘧啶(5-FU)治疗组、玻璃酸钠(SH)治疗组、对照组、正常饲养组。前三组用木瓜蛋白酶关节腔内注射制成骨关节炎模型后分别用5-FU,SH,生理盐水进行关节腔内注射治疗,每周一次,5周后处死动物,取滑膜、血清、关节液,观察4组滑膜组织电镜改变,检测血清和关节液中金属蛋白酶-3,一氧化氮的含量。细胞实验：无菌条件下取兔膝关节软骨,用酶消化法获取软骨细胞进行体外培养,在原代或第二代软骨细胞培养液中加入不同浓度的5-FU(25μ M,50μ M,100μ M,200μ M,400μ M)用MTT检测5-FU对软骨细胞存活率的影响。另取第二代软骨细胞,在培养液中加入不同浓度的5-FU(根据MTT结果),预处理12h后,加入IL-1β(5ng/ml)作用24h后检测细胞上清液中的NO含量及软骨细胞的凋亡情况。结果：动物实验：标本大体观察：5-FU组滑膜稍微增厚,未见软骨缺损,SH组滑膜较5-FU组明显增厚,关节面有溃疡形成,色泽灰暗,对照组滑膜增厚最明显,关节肿胀,滑膜关节软骨交界处可见软骨缺损、脱落,部分软骨下骨质暴露。正常组未见软骨缺损,滑膜未增厚。电镜结果：电镜观察显示正常组细胞膜完整,细胞结构正常。5-FU组可见滑膜细胞皱缩,质膜完整,胞浆致密,细胞核电子密度增高,见许多棘状突起,处于凋亡状态。玻璃酸钠组可见细胞器退变,如部分线粒体空泡样变性以及许多溶酶体肿大,细胞核内高度致密的染色质边集。对照组无正常滑膜细胞结构,可见由于炎症导致的大量线粒体空泡样变性。5-FU治疗组与SH组及对照组相比软骨破坏较轻,滑膜炎症明显抑制,血清及关节液中MMP-3,NO浓度降低(P<0.05)。细胞实验：MTT实验中25-200μM5-FU与空白对照组相比,细胞存活率无统计学差异(P>50.05),25-200μM5-FU可以浓度依赖性的抑制IL-1β诱导的细胞NO产生,并且经5-FU预处理组软骨细胞组的凋亡率与对照组相比明显下降。结论：5-FU及SH都可以减轻软骨破坏,5-FU相比SH抑制滑膜炎症效果更明显,血清及关节液中NO,MMP-3浓度更低。而将25-200μ M5-FU单独作用于离体培养的软骨细胞时,对软骨细胞存活率无影响,并且能够抑制由IL-1β诱导的NO产生,减少软骨细胞凋亡。