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糖类物质不仅是自然界中全部生命体的重要组成部分,还是一种重要的信息分子,在生命科学、化学、医学等学科研究中都具有举足轻重的地位。光谱和电化学方法具有仪器价格便宜、实验操作简单、灵敏度高等优点,在生物大分子与有机小分子相互作用的研究中广泛应用。本论文以生物多糖肝素钠为主要研究对象,由于肝素钠本身没有光谱和电化学信号,采用有机小分子染料作为光谱和电化学探针,利用其能与多糖糖苷链上的某些基团发生静电结合非共价键的相互作用生成生物超分子复合物的本质,以及分子识别反应导致溶液的光谱和电化学信号发生变化的现象,将光谱分析和电化学分析同多糖类物质的检测相结合,开展了生物多糖光谱和电化学分析新方法的研究。本论文主要包括以下内容: 1.选择了中性红和吖啶橙为光谱探针,利用分光光度法对肝素钠进行了测定。 根据有机小分子自身光谱特性,研究了体系加入肝素钠前后光谱信号的变化。从紫外-可见光谱图可以观察到有机小分子在紫外可见区有最大吸收峰,当体系中加入一定量的肝素钠后,溶液颜色变浅,最大吸收波长处的吸光度降低,表明有机染料与加入的肝素钠发生结合反应,生成了生物超分子复合物。对体系的识别条件进行了优化,考察了常见干扰物质如金属离子和氨基酸等对测定的影响。在最佳条件下,建立了测定肝素钠的工作曲线,并将所建立的方法应用于肝素钠注射液的测定,结果令人满意。用摩尔比法计算了体系的结合比。 2.选择了甲基紫、结晶紫、吡啰红B、亮绿等为电化学探针,用电化学分析法对肝素钠进行了测定。 电化学分析法由于灵敏度高、选择性好、适用范围广,成为研究生物大分子结构与功能关系的有效方法,也可以用于多糖类物质的分析。依据肝素的结构特点选择了相应的有机小分子染料如甲基紫、结晶紫、吡啰红B、亮绿等作为电化学探针,以滴汞电极、静汞电极等为工作电极,采用循环伏安法、线性扫描极谱法等电化学手段,根据分子识别前后体系电化学信号的变化,建立了多糖分析的新方法。在一定条件下,有机小分子在汞电极上可以发生电极还原反应,从而出现良好的线性扫描极谱波,当加入肝素钠后,峰电流明显降低,峰电流的降低值