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近年来,许多中药材如丹参、大黄等的作用都被人们认识了。所以,在临床上利用这些中药材制成的复方制剂也就得到了广泛的应用。丹七片有丹参和三七两味中药组成的。而丹参是我们常用中药的一种,中医理论认为,丹参性属微苦,微寒的药。归心经和肝经。其具有祛瘀止痛、活血通络、除烦清心的功效。据统计,已经应用于临床的丹参制剂多达上百种。丹参的复方中药制剂是基于天然中药材及传统的中医理论研究开发出的药品,具有安全系数高,疗效全面、疗效确切,无明显的不良反应及毒副作用。研究还证实,一些丹参制剂经过长期的服用可以取得良好的治疗效果。药品质量的可控性是药品的基本属性,也是其安全性、有效性的基础。经过查阅大量的文献,许多丹参、大黄制剂的质量控制方法已经有过报道,但是仍然有一部分丹参制剂的指标成分的质量控制方法是空白的,或者报道的只是其中一两种有效成分的质量控制方法,不能够全面评价药品的内在质量,或者一些中药复方制剂的控制方法需要进一步的改进和完善。为了进一步使中药复方制剂得到更安全、广泛的应用,我们把它的指标成分的质量控制作为研究的主要对象。药品的质量标准是控制药品质量的重要前提,能有效的控制药品的质量,确保药品的安全,是药品质量可控性的具体体现。本课题选用丹七片、痔康片片、参芪五味子片中的指标成分作为研究对象,采用高效液相色谱法对复方制剂中指标成分的质量控制进行较为系统的方法学研究。所建立的方法专属性强、精密度和稳定性良好,实验结果准确可靠,可为中药复方制剂的质量控制提供科学、有效的试验方法与依据。第一部分高效液相色谱法测定丹七片中丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B的含量目的:建立了高效液相色谱法测定丹七片中丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B的含量测定方法,为丹七片的质量控制提供依据。方法:采用高效液相色谱法测定丹七片中丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B的含量。色谱柱:Kromasil C18柱(250 mm×4.6mm,5μm),流动相:甲醇(A)~1%乙酸(B),柱温:室温,流速:1.0 m L.min-1,检测波长:281 nm。结果:在上述色潽条件下,丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B峰形良好,无其它峰干扰,理论塔板数均大于8000,与相邻色谱峰的分离度均大于1.5。丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B分别在0.202×103~2.02×103ng、0.0264×103~0.264×103ng、0.316×103~3.16×103ng,范围内有良好的线性关系,回归方程分别为:y=0.579x-1.00(r=1.000)、y=3.72x+5.16(r=0.9999)、y=0.609x-6.25(r=0.9999);该方法精密度试验的RSD值分别为0.18%、0.96%、1.0%;重复性试验的RSD值分别为0.42%、0.21%、0.09%;12小时内稳定性的RSD分别为0.52%、0.52%、0.25%;平均回收率分别为100.6%、99.6%、98.9%,RSD分别为0.51%、0.87%、1.2%、(n=6)。结论:该方法准确、方便、灵敏度高、稳定性好,可作为丹七片中丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B的含量测定方法。该方法也为丹七片的质量控制提供了依据。第二部分反相高效液相色谱法测定痔康片中大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量目的:建立了HPLC法测定痔康片中大黄素、大黄酚和大黄素甲醚三种蒽醌类成分的含量。方法:采用反相高效液相色谱法测定大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量。色谱柱:Diamonsil-C18柱(150×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-1%磷酸(80:20),柱温:25℃,流速:1.0 m L.min-1,检测波长:254 nm,进样量:20μl。结果:在选定的色谱条件下,大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的保留时间大约在8.8、13和20min,具有良好的分离度和稳定性;大黄素的回归方程为Y大黄素=3.12×10-5x+0.0790,r2=0.9997,在1.75~17.5μg.ml-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系,样品高、中、低加样回收率分别为99.9%(RSD=1.1%,n=3)、102.5%(RSD=0.38%,n=3)、98.1%(RSD=0.80%,n=3);大黄酚回归方程为Y大黄酚=2.34×10-5x+0.661,r2=0.9998,在11.1~111μg.ml-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系,样品高、中、低加样回收率分别为98.5%(RSD=1.25%,n=3)、101.8%(RSD=0.44%,n=3)、99.0%(RSD=0.72%,n=3);大黄素甲醚回归方程为Y大黄素甲醚=3.01×10-5x+0.246,r 2=0.9995,在5.25~52.5μg.ml-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系,样品高、中、低加样回收率分别为99.9%(RSD=0.99%,n=3)、100.6%(RSD=0.80%,n=3)、98.1%(RSD=0.19%,n=3)。结论:本实验建立了HPLC同时测定痔康片中大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量方法。该方法简便、灵敏、结果准确可靠,适用于该制剂中蒽醌类成分的质量控制。第三部分HPLC法同时测定参芪五味子片中槲皮素、五味子酯甲和五味子甲素的含量目的:建立了高效液相色谱法同时测定参芪五味子中槲皮素、五味子酯甲、五味子甲素的含量测定方法方法:采用Kromasil C18柱(250 mm×4.6mm,5μm),以甲醇(A)-0.1%乙酸(B)梯度洗脱,流速1 m L·min-1,柱温30℃,检测波长220nm。取三批参芪五味子,测定各批次中三种指标成分五味子中槲皮素、五味子酯甲、五味子甲素的含量。结果:在上述色潽条件下,槲皮素、五味子酯甲、五味子甲素峰形良好,理论塔板数均大于3000,与相邻色谱峰的分离度均大于1.5。槲皮素在0.0285×103~0.228×103ng(Y=1.53x+35.9,r=0.9995),五味子酯甲在0.297×103~2.37×103ng(Y=6.23x+57.7,r=0.9999),五味子甲素在0.189×103~1.51×103ng(Y=6.41x-5.88,r=1.000),范围内均呈良好的线性关系,平均回收率槲皮素为100.8%,RSD=0.69%(n=6);五味子酯甲为100.6%,RSD=1.2%(n=6);五味子甲素为99.6%,RSD=0.30%(n=6)。结论:本法简便,准确可靠,灵敏度高,稳定性好,可用于参芪五味子的质量控制。