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【目的】1、观察碘伏对浮游状态金黄色葡萄球菌的抗菌活性。2、通过激光共聚焦显微镜(CLSM)及扫描电镜(SEM)观察钛合金表面24小时金葡菌细菌生物膜结构。3、观察不同浓度的碘伏溶液对24小时细菌生物膜的体外抗菌活性,为临床上内植物相关感染的治疗方法提供参考。【方法】1、采用细菌悬液定量杀灭实验,观察碘伏对浮游状态金黄色葡萄球菌的抗菌活性。2、在钛合金盘表面构建24小时细菌生物膜模型,通过激光共聚焦显微镜及扫描电镜观察细菌生物膜结构。3、将临床上使用的碘伏原液按比例稀释成不同的实验浓度,分别对细菌生物膜浸泡作用5min;然后经过冲洗、超声振荡、涡旋振荡等操作后,采用表面涂布的活菌计数法,比较不同浓度碘伏对细菌生物膜的抗菌活性差异。4、使用碘伏原液对细菌生物膜浸泡作用10min,采用前述相同的计数方法观察碘伏的抗菌活性。【结果】1.实验室条件下,有效碘浓度为0.1%、0.2%、0.3%、0.4%以及0.5%的碘伏溶液作用30秒均可全部杀灭浮游状态的金黄色葡萄球菌。2、将24小时细菌生物膜进行荧光染色后,置于激光共聚焦显微镜下,可以清晰的观察到大片细菌生物膜结构,细菌成团块或斑片状聚集,活细菌与死菌重叠部分呈现黄色斑块。三维立体结构图提示生物膜呈立体结构,有一定厚度,细菌聚焦成团,活菌和死菌相互包绕。扫描电镜下观察可见钛合金表面细菌聚集成团,菌体被粘液样物质包绕,形成浓厚的云雾样生物膜。3、经过碘伏浸泡作用5min后,同对照组相比,使用有效碘浓度为0.1%的碘伏作用后,钛合金盘上的活菌计数即减少约230倍;0.2%碘伏作用后细菌浓度进一步降低,与0.1%组差异有统计学意义。随着碘伏浓度增高到0.3%后,生物膜内的活菌计数开始出现大幅度下降,和对照组相比相差约10000倍。随着碘伏浓度的进一步升高到0.4%以及0.5%,钛合金盘上的CFU活菌计数进一步下降,0.3%组与0.5%组比较仍然具有统计学差异。4、碘伏原液对细菌生物膜浸泡作用10min后,CFU计数为0。【结论】实验室条件下,碘伏不仅对浮游状态金黄色葡萄球菌具有强大的抗菌活性,对钛合金表面的24小时金葡菌生物膜也具有抗菌活性,且随着碘伏浓度的增加抗菌活性增强。有效碘浓度为0.1%的碘伏即可对细菌生物膜内细菌产生明显的杀菌作用;而有效碘浓度为0.3%以上的碘伏可以进一步显著杀灭生物膜的细菌。当使用碘伏原液(即有效碘浓度为0.5%)对生物膜浸泡作用5min时,虽可杀灭生物膜内绝大部分细菌,但仍无法完全根除,而延长至10min时则可以全部将生物膜内的细菌杀灭。