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目的：乙型肝炎病毒变异是目前乙肝诊疗中的一个突出问题。全世界乙肝病毒S基因变异率约为20％-40％；我国单纯乙肝疫苗免疫后携带者变异率为31％。本课题的目的就是要研制能够同时检测乙肝表面抗原野生株和多种变异株的ELISA快速诊断试剂盒，进一步建立完善的工艺流程，确定可行的技术质量标准，进一步提高我国当前乙型肝炎病毒(HBV)的检出率，为临床早期诊断、预防和控制HBV的传播奠定新的基础。
方法：进行了乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)ELISA方法学研究，建立了野生株检测免疫基本模式。利用单克隆抗体技术制备并筛选出能够同时与野生型和突变型乙肝病毒表面抗原进行特异性结合反应的单克隆抗体，用ELISA方法鉴定该抗体的亲和力和特异性。在基本模式基础上，将该抗体与野生株抗HBs混合包被于固相载体上。通过一系列方阵滴定，找出固相单抗与液相多抗的最佳配比，优化ELISA系统中其它各项技术条件，建立具有临床意义的HBsAg变异株质控品及标准，使试剂盒各项技术指标达到国家质量标准的同时，又具有对HBsAg变异株检测的最高灵敏度、特异性、准确性和稳定性的技术性能。
结果：1.建立了乙肝表面抗原野生株诊断试剂盒的基础模式，灵敏度、特异性、精密性、稳定性均符合国家标准。
2.制备出的单克隆抗体D12，经ELISA法鉴定，能同时与乙肝表面抗原野生株和多种变异株进行特异性结合反应，具有良好的亲和力和特异性。
3.建立了稳定的乙肝表面抗原变异株快速ELISA诊断试剂的工艺流程。试剂用于野生株及多种HBsAg变异株的检测，与目前常用检测试剂的技术指标相比，有明显优势，检出率有了很大提高。
结论：通过单克隆抗体技术，筛选出可特异识别变异表面抗原的单克隆抗体。经ELISA鉴定，该抗体与野生型和突变型乙肝病毒表面抗原均具有良好的亲和力和特异性。进一步改进的HBsAgELISA检测试剂，可显著降低表面抗原变异株的漏检率，将更有效地预防和控制乙型肝炎的发生，并具有简便、快速、特异、灵敏、稳定的特点，可减少检测费用，便于推广使用，将产生明显社会效应和经济效益。