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动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是冠心病和心血管疾病的主要病因,后两者在全球具有极高的致病率和致死率。另外,动脉粥样硬化也伴随着慢性炎症的发生,而核转录因子kappa B (nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号转导通路已被证实对炎症的发生起着关键的作用。现已证实,氧化低密度脂蛋白与动脉粥样硬化的病理机制存在着密切的关系。7-酮基胆甾醇-9-羧基壬烷(7-ketocholesteryl-9-carboxynonanoate,oxLig-1)被认为是β2-糖蛋白Ⅰ的特异性配体,其作为氧化低密度脂蛋白的成分之一,对动脉粥样硬化病变部位的发展起到一定的作用。目前的研究主要集中于oxLig-1/β2-糖蛋白Ⅰ复合物与自身抗体对动脉硬化病理机制的解释上,但是对于oxLig-1自身对动脉硬化发病机制的影响却未见报道。本研究通过7-酮基胆固醇(7-ketocholesterol,7-KC)和壬二酸在酯缩合反应催化剂DCC/DMAP的存在下对oxLig-1进行了全合成,随后以AS相关免疫细胞J774A.1小鼠巨噬细胞株作为模型,分别考查了oxLig-1及其合成前体7-KC对NF-κB信号通路的影响。首先,对7-KC导致的J774A.1细胞凋亡的分子机制进行了研究。Western blot和免疫染色实验结果显示7-KC能激活NF-κB信号转导通路,并且这种激活与时间和浓度呈依赖性。DNA片段化实验和流式细胞术证实了7-KC能诱导细胞发生凋亡。在使用NF-κB特异性抑制剂—二硫代氨基甲酸吡咯烷(pyrrolidine dithiocarbamate ,PDTC)后,发现7-KC诱导的细胞凋亡得到了抑制。PDTC抑制后早期凋亡的细胞显著减少,表明7-KC通过激活NF-κB导致J774A.1细胞发生凋亡。随后对oxLig-1的研究发现,其能激活J774A.1细胞蛋白激酶C信号通路,进而激活NF-κB。进一步采用电泳迁移率实验证实了oxLig-1诱导的NF-κB与DNA特异位点的结合活性。研究还发现β2-GPI能抑制oxLig-1诱导的IκBα磷酸化和NF-κB/p65的核转位,说明β2-GPI对oxLig-1介导的NF-κB的活化会产生一定的影响。另外,基因芯片数据表明oxLig-1诱导的NF-κB活化会对下游相关细胞因子的表达起到一定的调控作用,如细胞粘附因子、炎症相关因子和凋亡相关因子等,这些细胞因子都影响着动脉粥样硬化的发生和发展。上述结果表明oxLig-1作为氧化低密度脂蛋白的成分之一,通过激活NF-κB信号通路影响动脉粥样硬化的发生发展。