伏马菌素是由串珠镰刀菌（Fusarium moniliforme）所产生的一类水溶性代谢产物,能污染玉米、小麦、水稻等谷类及其制品。伏马菌素B₁（Fumonisin B₁,FB₁）是串珠镰刀菌培养物的主要成分,也是导致伏马菌素毒性作用的主要因素。胶体金免疫层析法是基于单克隆抗体和胶体金材料的基础上发展起来的一种侧向层析技术,已成为目前真菌毒素检测的新的研究方向。该检测方法操作简便,适应于大量样本的快速检测。本试验采用免疫层析法,研制出FB₁检测用胶体金试纸条,并用于玉米中FB₁的快速检测。将杂交瘤细胞进行扩大培养,注射入小鼠腹腔,收集腹水并进行纯化,制备出FB₁单克隆抗体,分别通过聚丙烯酰胺凝胶电泳法（SDS-PAGE）和间接酶联免疫法（Ci-ELISA）对抗体的纯度及效价进行检测;采用戊二醛一步法对半抗原FB₁与卵清蛋白（OVA）偶联,制备完全抗原,通过SDS-PAGE和质谱法（MS）对FB₁与OVA鉴定偶联效果。胶体金溶液的制备采用柠檬酸钠还原法。试验对金标抗体、FB₁-OVA包被量及羊抗鼠IgG包被浓度进行选择,并对试纸条的应用性能进行评价。试验结果如下:1.单克隆抗体浓度为1.3 mg·mL^-1,经过间接ELISA方法的检测,可得单抗的效价为1:1024。人工抗原FB₁-OVA偶联成功,FB₁与OVA的偶联比为6.2:1,浓度为0.8 mg·mL^-1。2.本试验制备的胶体金溶液粒径为25 nm、20 nm、15 nm。制备金标抗体最适pH值为7.0,即1 mL胶体金溶液加入15μL 0.2 mol·L^-1 K2CO3。胶体金与单克隆抗体的最佳结合量为1 mL胶体金溶液加入7μL抗体。胶体金免疫层析试纸条的金标抗体最佳包被量为0.4μg·cm^-1,检测抗原最佳包被量为0.3μg·cm^-1,质控线最佳包被浓度为0.10 mg·mL^-1。试纸条的灵敏度为2 ng·mL^-1,最佳判定浓度为40 ng·mL^-1。3.本试验研制的胶体金免疫层析试纸条与AFB₁、DON、ZEN和OTA等几种常见真菌毒素无特异性结合,稳定性良好,加标回收效果较好,检测玉米样品结果与高效液相色谱法检测结果一致。综上所述,本试验研制的胶体金免疫层析试纸条可准确、快速检测玉米中的FB₁。