磨牙症对应激大鼠杏仁核及前额叶皮质中GAT-1的影响

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目的:通过观察磨牙症对应激大鼠的行为学及杏仁核、前额叶皮质γ-氨基丁酸转运体-1(GAT-1)变化的影响,探讨磨牙症缓解压力的作用机制。方法:1.动物模型建立:将清洁级成年健康雄性Sprague Dawley大鼠共52只,体重280-300g(河北医科大学实验动物中心提供)分成对照组(CO组)、应激组(ST组)、磨牙症组(SC组)。ST组、SC组大鼠均置于固定筒中束缚30min,同时,SC组给予直径5mm木棍以供其咀嚼,咀嚼少于15min者不予使用。CO组常规饲养,不受任何刺激干扰。2.行为学实验:将实验大鼠迅速置于实验箱中心,箱高50cm,底面为80cm×80cm被分成面积相等的16个方格的正方形,箱的内壁和底面均为黑色。通过记录3min内各组大鼠水平运动和垂直运动得分,以旷场试验活动度(OF值)测试其焦虑程度。3.免疫组织化学染色:旷场试验结束后随机挑选大鼠18只(每组6只)立即处死,取出脑组织经固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、制片,做γ-氨基丁酸转运体-1(GAT-1)免疫化学组织染色,显微镜下截取杏仁核、前额叶皮质区,Image J测量各组阳性细胞平均光密度值(AOD值)。4.实时定量PCR:旷场试验结束后随机挑选大鼠18只(每组6只)立即处死,冰上取杏仁核、前额叶皮质组织,进行组织内总RNA的提取、RNA逆转录合成c DNA、PCR扩增,检测各组GAT-1m RNA表达情况。结果:1.旷场试验:与CO组相比,ST组大鼠焦虑程度显著增加;SC组大鼠焦虑程度较ST组显著降低,与CO组差异无统计学意义(P>0.05)2.免疫组织化学染色:与CO组相比,ST组大鼠杏仁核与前额叶皮质AOD值显著升高(P<0.05);SC组大鼠较ST组大鼠杏仁核与前额叶皮质AOD值显著降低(P<0.05),与CO组差异无统计学意义(P>0.05)。3.实时定量PCR:与CO组相比,ST组大鼠杏仁核与前额叶皮质GAT-1m RNA表达显著升高(P<0.05);SC组大鼠较ST组大鼠杏仁核与前额叶皮质GAT-1 m RNA表达显著降低(P<0.05),与CO组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.磨牙症具有缓解压力的作用。2.磨牙症可以通过纠正杏仁核、前额叶皮质GAT-1的异常表达调节GABA代谢失常而发挥缓解压力的作用。
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