凤阳麝香霉(Muscodor fengyangensis)菌株ZJLQ024生物制剂初探

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麝香霉(Muscodor spp.)是一类属于炭角菌科的内生真菌,最早由Worapong等(2001)从肉桂树分离所得,其显著特征是能产生挥发性有机化合物(volatile organic compounds,VOCs),这些VOCs具有广泛的生物活性,能抑制或杀死多种病原真菌、病原细菌和一些昆虫。而后,人们利用其特有的形态学、生理学、生物化学方面的特征及核糖体RNA的序列来寻找和鉴定新的麝香霉属内生真菌,越来越多的麝香霉种被发现。本实验以凤阳麝香霉(M. fengyangensis)菌株ZJLQ024为研究对象,对VOCs的产生、活性及其应用进行了初步研究,取得以下结果:1、通过基因组测序,将已知代谢途径相关的编码酶基因与凤阳麝香霉ZJLQ024基因组序列进行比对,初步推测VOCs主要成分3-甲基-1-丁醇、2-甲基丁醇、α-水芹烯、p-水芹烯和p-石竹烯的生物合成途径,为进一步了解麝香霉VOCs的生物合成途径、定向改造具有更强生物活性的菌株奠定基础。2、通过活性炭吸附麝香霉培养过程中产生的VOCs,发现活性炭处理的麝香霉生长速度加快;同时,活性炭处理的麝香霉VOCs成分大大减少、对病原指示菌的抑制能力减弱。结果表明麝香霉产生的VOCs对其自身生长具有一定的抑制作用。3、通过对凤阳麝香霉麦粒培养基摇瓶发酵条件进行优化,确定最佳接种种龄为一级液体发酵6天,最佳接种体积为20%(V/W),发酵10-12天的凤阳麝香霉ZJLQ024的固体发酵产物产生的VOCs具有强烈的抑菌活性;并在此基础上,初步探索了麦粒培养基50L固体发酵罐发酵生产麝香霉。此外,进一步探索了凤阳麝香霉对基质的利用情况,表明最适C源为蔗糖、N源为酵母膏(有机氮源)和磷酸二氢铵(无机氮源),培养基基质配比为40%麸皮、30%豆饼、20%玉米粒和10%米糠。4、初步确定凤阳麝香霉生物制剂的制备和保存,利用海藻糖、海藻酸钠和黄原胶溶液包衣麝香霉固体发酵产物,风干后真空、4-10℃下保存的货架期达到1年。凤阳麝香霉作为熏蒸剂进行了初步探索,结果表明制剂对苹果采后病害青霉病有一定的抑制。
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