【摘 要】
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经过抽提、选择性酸变性、20﹪~40﹪饱和度(NH4)2SO4分部盐析、SephadexG-25柱层析和DEAE-SepharoseFastFlow离子交换柱层析等纯化步骤从水稻叶片中纯化了乙醇酸氧化酶,比活性
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经过抽提、选择性酸变性、20﹪~40﹪饱和度(NH4)2SO4分部盐析、SephadexG-25柱层析和DEAE-SepharoseFastFlow离子交换柱层析等纯化步骤从水稻叶片中纯化了乙醇酸氧化酶,比活性达到7.1U/mg蛋白质,纯化倍数为44.1倍;SDS-PAGE得到一条清晰的蛋白质染色条带。在不同氮素培养条件下的水稻GO在纯化过程中其酶蛋白的物化特性无明显差异。
纯化后的水稻叶片GO对乙醇酸和乙醛酸均有氧化活性,其氧化乙醇酸和乙醛酸的活性之比随酶纯度的提高而增大。在贮存过程中纯化酶的两种催化活性均有下降的趋势,但是两者的比值却没有发生变化。
水稻叶片GO氧化乙醇酸和乙醛酸的反应最适pH值在8.0左右;pH在7.4~9.4之间GO活性稳定。0℃低温对GO的活性无影响。
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